rAAV介导的靶向HIF-1α小干扰RNA在乏氧条件下对MiaPaCa2细胞Glut-1表达的影响

目的：以重组腺相关病毒（rAAV）为载体介导以HIF-1α为靶点的小干扰RNA，在厌氧培养条件下作用于MiaPaCa2人胰腺癌细胞．观察其对糖代谢反应关键酶--葡萄糖转运体-1（Glut-1）表达的影响。方法：构建rAAV介导的以HIF-1α为靶基因的RNA干扰表达载体，即rAAV-siHIF。将rAAV-hrGFP、rAAV-siHIF-1α分别转染对数生长的MiaPaCa2人胰腺癌细胞，在乏氧条件下进行培养，应用Real-Time PCR、RT-PCR、Western Blot法观察其对MiaPaCa2细胞HIF-1α mRNA、蛋白以及Glut-1 mRNA、蛋白表达的影响。结果：Real-Time PCR和Western Blot检测发现。rAAV-siHIF-1α能够抑制MiaPaCa2细胞HIF-1α mRNA和蛋白的表达。RT-PCR和Western Blot检测发现，rAAV-siHIF-1α能抑制MiaPaCa2细胞Glut-1 mRNA和蛋白的表达。结论：rAAV-siHIF-1α能抑制MiaPaCa2人胰腺癌细胞糖代谢关键酶Glut-1表达的作用。