| SHH信号通路调控hiPSCs定向分化为腹侧底板类神经前体细胞 |
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| 引用本文： | 冯俊达,徐丽萍,吴玉兰,苏中强,谢海航,梁宁,蔡浩然,龙大宏.SHH信号通路调控hiPSCs定向分化为腹侧底板类神经前体细胞[J].解剖学研究,2019,41(1):5-11. |
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| 作者姓名： | 冯俊达 徐丽萍 吴玉兰 苏中强 谢海航 梁宁 蔡浩然 龙大宏 |
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| 作者单位： | 广州医科大学基础学院,广东广州,511436;广州医科大学基础学院,广东广州,511436;广州医科大学基础学院,广东广州,511436;广州医科大学基础学院,广东广州,511436;广州医科大学基础学院,广东广州,511436;广州医科大学基础学院,广东广州,511436;广州医科大学基础学院,广东广州,511436;广州医科大学基础学院,广东广州,511436 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;广东省自然科学基金;广州医科大学高水平大学建设科研教学学术提升项目 |
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| 摘 要： | 目的激活Sonic Hedgehog(SHH)信号通路促进人诱导性多能干细胞(hiPSCs)定向分化为腹侧底板类细胞。方法将hiPSCs设3个实验组:LDN193189+SB431542组(LSB组)、SHH C24-II+Purmorphamine组(SHH组)和Cyclopamine组(CYC组)。采用RT-qPCR检测诱导第7天各组细胞背侧前脑标志物PAX6、腹侧底板标志物FOXA2和SHH信号通路关键因子SHH、Ptc-1、Smo、Gli-1及诱导第11天多巴胺能神经前体细胞LMX1A、EN1的mRNA表达。免疫细胞化学(ICC)检测诱导第7天FOXA2、PAX6及分化第25天多巴胺能神经元标志物TH的蛋白表达。结果 RT-qPCR结果显示分化第7天,SHH组FOXA2的mRNA表达明显上调(P<0.01),PAX6的表达明显下调(P<0.01);SHH信号通路相关因子SHH、Ptc-1及Gli-1的表达明显上调(P<0.01),Smo的表达无明显变化;ICC结果显示LSB组、CYC组以PAX6+细胞为主;SHH组以FOXA2~+细胞细胞为主;分化第11天,SHH组多巴胺能神经前体标志物LMX1A及EN1的mRNA表达量较LSB组高(P<0.05);分化第25天ICC结果显示SHH组TH+细胞数量较LSB、CYC组多。结论分化早期激活SHH信号可诱导hiPSCs定向分化为FOXA2~+的腹侧底板细胞,该类细胞能进一步分化为多巴胺能神经前体细胞及多巴胺能神经元。
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| 关 键 词： | 人诱导性多能干细胞 SHH信号通路 腹侧底板 神经前体细胞 帕金森病 |
Derivation of ventral floor plate like neural precursor cells from human induced pluripotent stem cells through the regulation of Sonic Hedgehog signaling pathway |
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