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t(8;21)急性髓系白血病CD34~-白血病干细胞的确认和特征的体外研究
摘    要:目的:通过体外实验初步确定t(8;21)急性髓系白血病(AML)中CD34~-白血病干细胞(LSC)的存在。方法:检测初诊t(8;21)AML骨髓样本,在荧光抗体标记后利用流式细胞仪分选出3个细胞群:Lin~-CD34~+CD38~-(简称为CD34~+CD38~-)、Lin~-CD34~+CD38~+(简称为CD34~+CD38~+)及Lin~-CD34~-CD38~-CD45~(dim)SSC~(low)(简称为CD34~-"LSC")。通过Hochest 33342和派洛宁Y(PY)双染色及乙醛脱氢酶(ALDH)活性检测实验比较各细胞群G_0期细胞和ALDH~(br)细胞比例。分选各细胞群后采用实时定量PCR技术检测AML1-ETO和WT1 mRNA水平。结果:检测3例患者的G0期细胞比例均为CD34~-"LSC"CD34~+ CD38~-CD34~+ CD38~+。配对t检验显示,53例检测的患者CD34~-"LSC"及CD34~+CD38~-中ALDH~(br)细胞比例均显著高于CD34~+ CD38~+中(P=0.0004,P0.0001),并且CD34~-"LSC"中ALDH~(br)细胞比例显著高于CD34~+ CD38~-(P=0.003)。3例分选的患者的3群细胞之间AML1-ETO mRNA水平相似,而CD34~-"LSC"的WT1 mRNA水平均明显高于另2个细胞群。结论:t(8;21)AML骨髓CD34~-细胞群可能含有LSC,并且可能比CD34~+ CD38~-更原始。

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