| 重组丙型肝炎病毒基因转染H9细胞模型的建立 |
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| 引用本文： | 刘勇,陈智.重组丙型肝炎病毒基因转染H9细胞模型的建立[J].中华肝脏病杂志,1997,5(2):103-105. |
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| 作者姓名： | 刘勇 陈智 |
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| 作者单位： | 浙江医科大学传染病研究所 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金,国家教委归国留学人员科研启动基金 |
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| 摘 要： | 目的：建立重组ＨＣＶ基因转染的Ｈ９细胞（人ＣＤ４，Ｔ细胞）模型。方法：以载体ＣＤＺ２（连接有１６９３ｂｐＨＣＶＤＮＡ，包括完整的ＨＣＶ结构区）为模板，通过ＰＣＲ获得高保真的１．７３ｋｂＤＮＡ片段（包括１６９３ｂｐＨＣＶｃＤＮＡ和部分载体ＤＮＡ序列），其特异性被ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ证实。将ＨＣＶｃＤＮＡ片段插入载体ｐＣＤ－ＳＲα，经菌落原位杂交以及酶切分斤和ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｏＩｔ筛选，获得重组ＨＣＶ（ｐＣＤ－ＨＣＶ），并与ｐＳＶ２－ｇｐｔ载体共转染Ｈ９细胞。结果：从选择性培养基中筛选口阳性克隆细胞，经ＲＴ－ＰＣＲ．ｄｏｔＥＬＩＳＡ和ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ验证表明ｐＣＤ－ＨＣＶ在Ｈ９细胞中可进行复制、转录和表达，表达的约１．３×１０５大小蛋白具有ＨＣＶ抗原性。转染ｐＣＤ－ＨＣＶ的细胞培养至９０天时，仍可检测到ＨＣＶｍＲＮＡ和ＨＣＶ抗原。结论：建立ｐＣＤ－ＨＣＶ转染的Ｈ９细胞模型获得成功。
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| 关 键 词： | 丙型肝炎病毒，重组，H9细胞株，转染 |
ESTABLISHMENT OF H9 CELL MODEL TRANSFECTED BY RECOMBINANT HEPATITlS C VIRUS |
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| Liu Yong,Chen Zhi,Liu Kezhou,et al..ESTABLISHMENT OF H9 CELL MODEL TRANSFECTED BY RECOMBINANT HEPATITlS C VIRUS[J].Chinese Journal of Hepatology,1997,5(2):103-105. |
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| Authors: | Liu Yong Chen Zhi Liu Kezhou |
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| Institution: | Liu Yong,Chen Zhi,Liu Kezhou,et al. Institute of Infectiouss Disease,Zhejiang Medical University,Hangzhou 310003 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Hepatitis C virus Recombinant H9 cell line Transfection |
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