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| 生长因子受体结合蛋白-2抑制肠癌细胞HT29增殖 | |
| 引用本文： | 陈丽妹,叶韵斌,刘枋,陈慧菁,李洁羽,苏光建,林巧燕.生长因子受体结合蛋白-2抑制肠癌细胞HT29增殖[J].基础医学与临床,2013,33(9). |
| 作者姓名： | 陈丽妹 叶韵斌 刘枋 陈慧菁 李洁羽 苏光建 林巧燕 |
| 作者单位： | 1. 福建医科大学研究生教育学院,福建福州350014;福建医科大学教学医院福建省肿瘤医院肿瘤免疫学研究室,福建福州350014;福建医科大学检验科,福建福州350014 2. 福建医科大学研究生教育学院,福建福州350014;福建医科大学教学医院福建省肿瘤医院肿瘤免疫学研究室,福建福州350014;福建医科大学福省肿瘤转化医学重点实验室,福建福州350014 3. 福建医科大学研究生教育学院,福建福州350014;福建医科大学教学医院福建省肿瘤医院肿瘤免疫学研究室,福建福州350014;福建医科大学输血科,福建福州350014 |
| 摘 要： | 目的 研究Grb2 shRNA转染对肠癌细胞HT29增殖相关信号通路的影响,探讨以Grb2为肠癌治疗靶点的可行性.方法 应用shRNA慢病毒质粒系统,将Grb2 shRNA转染至293T细胞,获得5株不同序列Grb2 shRNA慢病毒颗粒,并感染肠癌HT29细胞,分别获得的5株感染Grb2 shRNA慢病毒颗粒的肠癌HT29细胞系为实验组(即感染Grb2 shRNA的细胞HT29/shGrb2-69、HT29/shGrb2-70、HT29/shGrb2-71、HT29/shGrb2-72、HT29/shGrb2-73),以eGFP shRNA慢病毒感染肠癌HT29细胞为阴性对照组.MTT法检测细胞增殖情况,RT-PCR检测Grb2 mRNA表达,Western blot检测Grb2、P42/44 ERK、磷酸化P42/44 ERK、Akt、磷酸化Akt(P-Akt)和STAT5等信号通路分子表达的改变.结果 感染shGrb2病毒72 h,HT29/shGrb2-69、HT29/shGrb2-73两株细胞在mRNA和蛋白水平均出现抑制现象.HT29/shGrb2-69、HT29/shGrb2-73细胞在感染后24h A值分别为0.176±0.045,0.186±0.013,感染48 h后为0.347±0.048、0.382±0.041均显著高于空白对照、阴性对照(P ＜0.001),72 h为0.934±0.038、0.983±0.205高于空白对照、阴性对照(P＜0.01);感染后72 h,phospho-P42/44 ERK、Akt、phospho-Akt明显下降,而ERK、STAT5表达不受影响.结论 在HT29细胞,Grb2 mRNA和蛋白水平上明显抑制,可诱导HT29细胞增殖和相关信号传导通路分子表达下调. |
| 关 键 词： | 结直肠癌 Grb2 RNA干扰 慢病毒 信号通路 |
Growth factor receptor bound protein-2 inhibits colon cancer HT29 cell proliferation |
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| Abstract: | |
| Keywords: | colorectal cancer Grb2 RNAi lentivirus signaling pathway |
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