| 重组人可溶性DR5 蛋白的表达、制备及其生物活性检测 |
| |
| 引用本文： | 梁晓红,孙汶生,高立芬,马春红,韩丽辉,王晓燕,张宁,郭春. 重组人可溶性DR5 蛋白的表达、制备及其生物活性检测[J]. 山东大学学报(医学版), 2004, 42(3): 252-256 |
| |
| 作者姓名： | 梁晓红 孙汶生 高立芬 马春红 韩丽辉 王晓燕 张宁 郭春 |
| |
| 作者单位： | 山东大学医学院免疫学研究所,山东,济南,250012;山东大学药学院生化制药教研室,山东,济南,250012 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金，海外青年学者合作研究基金资助项目(NO 30128023) |
| |
| 摘 要： | 目的：纯化毕赤酵母GS115菌株表达的重组人可溶性死亡受体5(DR5)蛋白，并研究其对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)所诱导细胞凋亡的阻断效应。方法：大量扩增可溶性DR5酵母表达载体转化阳性的毕赤酵母GS115菌株，收集上清，利用ProBond^TM亲和层析柱纯化获得重组可溶性DR5蛋白，用SDS-PAGE、Western Blot检验纯化产物的特异性和纯度。用MTT法检测纯化的可溶性DR5蛋白对TRAIL诱导人宫颈癌细胞系Hela细胞凋亡作用的阻断效应。结果：转化阳性的毕赤酵母GSll5菌株可成功表达分子量为26kD的可溶性DR5蛋白，经ProBond^TM亲和层析柱纯化。SDS-PAGE、Western Blot鉴定，结果显示获得了高纯度的重组人可溶性DR5蛋白，蛋白产量达20斗g／ml；体外活性检测结果显示，纯化的可溶性DR5蛋白可部分阻断TRAIL诱导的Hela细胞的凋亡，阻断率最高达53．6％。结论：经纯化后的重组人可溶性DR5蛋白可有效阻断TRAIL诱导的细胞凋亡反应。
|
| 关 键 词： | 重组蛋白类 HeLa细胞 受体 DR5 细胞凋亡 |
| 文章编号： | 1671-7554(2004)03-0252-05 |
| 修稿时间： | 2003-09-26 |
Expression and preparation of recombinant human soluble DR5 and detection of its biological activity |
| |
| LIANG Xiao-hong,SUN Wen-sheng,GAO Li-fen,et al. Expression and preparation of recombinant human soluble DR5 and detection of its biological activity[J]. Journal of Shandong University:Health Sciences, 2004, 42(3): 252-256 |
| |
| Authors: | LIANG Xiao-hong SUN Wen-sheng GAO Li-fen et al |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Receptors DR5 Recombinant proteins HeLa cells Apoptosis |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ |
