PCR制备地高辛配基标记的探针检测登革病毒核酸 |
| |
引用本文: | 庄坚,郭辉玉,陈火胜.PCR制备地高辛配基标记的探针检测登革病毒核酸[J].中山医科大学学报,1993,14(1):21-25. |
| |
作者姓名: | 庄坚 郭辉玉 陈火胜 |
| |
作者单位: | 中山医科大学微生物学和免疫学教研室 |
| |
摘 要: | 用聚合酶链反应(PCR)技术,以重组质粒PDEⅡ305 DNA为模板.在底物中补充标记的脱氧尿嘧啶核苷三磷酸(DIG-dUTP),经扩增反应制备了地高辛配基标记的登革病毒2型(DEN2)cDNA探针。DNA-RNA斑点杂交表明该探针有DEN2型特异性,可检出0.1pgDEN2-RNA。PCR扩增标记只用10ng模板DNA,数小时内可制备约1ug标记的cDNA探针,而用六聚棱苷酸随机引物(RHP)标记,从质粒DNA酶切、片段回收到标记获得探针,至少需数10h。可见PCR技术直接制各地高辛配基标记的cDNA探针较方便,快速、标记率高、特异性强,具有一定的应用前景。
|
关 键 词: | 地高辛 DEN 标记 配基 登革病毒 cDNA探针 特异性 核酸 RNA斑点杂交 质粒DNA |
本文献已被 维普 等数据库收录! |
|