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| 巨噬细胞炎性蛋白4的突变和原核表达 | |
| 引用本文： | 李树钧,戚好文,季少平,遆新宇,张英起,药立波.巨噬细胞炎性蛋白4的突变和原核表达[J].第四军医大学学报,2002,23(22):2040-2043. |
| 作者姓名： | 李树钧 戚好文 季少平 遆新宇 张英起 药立波 |
| 作者单位： | 1. 第四军医大学西京医院呼吸内科,陕西,西安,710033 2. 第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室,陕西,西安,710033 3. 第四军医大学科研部生物技术中心,陕西,西安,710033 |
| 摘 要： | 目的 探索如何抑制嗜酸细胞的趋化作用，选择β-趋化因子巨噬细胞炎性蛋白4（MIP4）的突变性（Met-MIP4)作为趋化因子受体3的拮抗剂，将Met-MIP4基因在原核细胞中进行表达。方法 设计MIP4基因的PCR引物并进行氨基酸突变，将MIP4N末端的丙氨酸突变为蛋氨酸，以正常人肺酸突变，将MIP4N末端的丙氨酸突变为蛋氨酸。以正常人肺cDNA文库为模板，PCR方法获取Met-MIP4基因，克隆入载体pUC19，测序验证序列已得到突变，将正确的基因插入到GST融合表达载体pGEX-4T中，以IPTG诱导表达。结果 PCR产物为220bp左右的片段，连接入pUC19质粒后测序验证获得正确突变，构建的pGEX-4T融合表达载体在大肠杆菌中表达，经SDS-PAGE凝胶电泳显示有大小约34kU的新生融合蛋白表达。结论 成功突变并克隆了β-趋化因子MIP4基因，SDS-PAGE表明，与GST融合的Met-MIP4突变体已得到表达，为进一步研究其生物学活性奠定了基础。 |
| 关 键 词： | 巨噬细胞炎性蛋白4 趋化因子 分子克隆 基因表达 遗传载体 |
| 文章编号： | 1000-2790(2002)22-2040-04 |
| 修稿时间： | 2002年8月10日 |
Mutation and expression of β-chemokine macro-phage inflammatory protein 4 |
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| LI Shu Jun ,QI Hao Wen ,JI Shao Ping ,DI Xin Yu ,ZHANG Ying Qi ,YAO Li Bo.Mutation and expression of β-chemokine macro-phage inflammatory protein 4[J].Journal of the Fourth Military Medical University,2002,23(22):2040-2043. | |
| Authors: | LI Shu Jun QI Hao Wen JI Shao Ping DI Xin Yu ZHANG Ying Qi YAO Li Bo |
| Institution: | LI Shu Jun 1,QI Hao Wen 1,JI Shao Ping 2,DI Xin Yu 1,ZHANG Ying Qi 3,YAO Li Bo 2 1Department of Respiratory Medicine,Xijing Hospital,Xi'an 710033,China,2Department of Biochemistry & Molecular Biology,Faculty of Preclinical Medicine,3Center of Biotechnology,Research Administration,Fourth Military Medical University |
| Abstract: | |
| Keywords: | chemotactic factors cloning molecular gene expression genetic vectors |
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