环介导等温扩增快速可视化检测B族链球菌的应用研究

目的建立环介导等温扩增(LAMP)快速检测B族链球菌(GBS)的方法并探讨此方法在临床诊断中的应用价值。方法培养GBS,提取病原体DNA,设计GBS 16S-23SrRNA基因间隔区LAMP引物,优化并建立LAMP检测GBS的方法。分析LAMP法检测GBS DNA灵敏度,并与聚合酶链反应(PCR)法进行对比。分析LAMP法检测GBS DNA的特异度。结果 LAMP法可在1h内实现GBS DNA的可视化检测,检测限为20fg,灵敏度高于PCR法(200fg)。LAMP法检测50例经PCR法确诊的GBS感染的临床样本,结果均为阳性,凝固酶阴性葡萄球菌、大肠埃希菌、淋病奈瑟菌、白色念珠菌的检测结果均为阴性。结论 LAMP检测GBS快速、简便、灵敏高且特异度强,检测不需任何设备,借助荧光笔肉眼直接判读,有望成为社区及基层医院广泛开展的新方法。