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S100PshRNA慢病毒载体的构建及其对胃癌MGC-803细胞生物学行为的影响
引用本文:张齐,胡浩霖,石欣,汤文浩.S100PshRNA慢病毒载体的构建及其对胃癌MGC-803细胞生物学行为的影响[J].东南大学学报(医学版),2015(1).
作者姓名:张齐  胡浩霖  石欣  汤文浩
作者单位:东南大学附属中大医院 普外科,南京 江苏,210009
摘    要:目的::构建针对S100P基因的shRNA慢病毒载体,并在胃癌MGC-803细胞上鉴定沉默效率,观察其对细胞生物学行为的影响。方法:筛选的S100P基因特异性siRNA靶点,合成短发卡结构shRNA,并与GV115-GFP慢病毒载体重组形成shRNA表达载体,与pHelper 1.0和pHelper 2.0质粒共转染293T细胞,产生慢病毒。用病毒感染MGC-803细胞,RT-PCR和Western blot检测靶基因的沉默效率、克隆形成情况、细胞周期变化和凋亡实验观察靶基因沉默对MGC-803的影响。结果:构建的重组shRNA慢病毒载体,经293T细胞包装获得病毒颗粒,和阴性对照相比,慢病毒感染组S100 P mRNA表达下降了83.4%,蛋白表达也明显受到抑制。 S100 P沉默后MGC-803的克隆形成能力明显减弱,细胞周期发生S期阻滞,细胞凋亡明显增加。结论:成功地构建了S100P基因shRNA慢病毒表达载体,该载体能够在MGC-803细胞中沉默S100P基因的表达,导致胃癌细胞克隆形成能力降低,细胞周期阻滞,诱导细胞凋亡,表明S100 P基因有可能具有影响胃癌发生发展的作用。

关 键 词:S100  P  shRNA  慢病毒  细胞凋亡

Construction of shRNA lentiviral vector of S100 P gene and its effect on biological behavior of MGC-803 cells
ZHANG Qi,HU Hao-lin,SHI Xin,TANG Wen-hao.Construction of shRNA lentiviral vector of S100 P gene and its effect on biological behavior of MGC-803 cells[J].Journal of Southeast Univ: Medical Sci Ed,2015(1).
Authors:ZHANG Qi  HU Hao-lin  SHI Xin  TANG Wen-hao
Abstract:
Keywords:S100P  shRNA  lentivirus  apoptosis
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