RNA干扰技术抑制肺癌细胞外源性绿色荧光蛋白的表达 |
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引用本文: | 王昌明,王绩英,曾锦荣,莫碧文,蒋明,林云,韦江红. RNA干扰技术抑制肺癌细胞外源性绿色荧光蛋白的表达[J]. 华夏医学, 2008, 21(6) |
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作者姓名: | 王昌明 王绩英 曾锦荣 莫碧文 蒋明 林云 韦江红 |
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作者单位: | 桂林医学院附属医院呼吸内科,广西,桂林,541001;桂林医学院附属医院呼吸内科,广西,桂林,541001;桂林医学院附属医院呼吸内科,广西,桂林,541001;桂林医学院附属医院呼吸内科,广西,桂林,541001;桂林医学院附属医院呼吸内科,广西,桂林,541001;桂林医学院附属医院呼吸内科,广西,桂林,541001;桂林医学院附属医院呼吸内科,广西,桂林,541001 |
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基金项目: | 广西科技厅自然科学基金,广西卫生厅重点科研课题 |
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摘 要: | 目的:构建针对绿色荧光蛋白(GFP)基因的发夹结构RNA(small hairpin RNA,shRNA)表达载体(pshRNA-GFP),观察对肺癌A549细胞的GFP特异性抑制作用。方法:设计针对GFP基因的shRNA序列,构建pshRNA-GFP质粒。与报告基因质粒PEGFP-N1共转染A549细胞,分别用激光共聚焦扫描显微镜(Laser confocal seanning mieroscope,LCSM)和流式细胞术检测干扰效果。结果:瞬时共转染pshRNA-GFP质粒和PEGFP-N1质粒后,荧光显微镜观察结果显示A549细胞中发出荧光的细胞数量减少,荧光强度明显降低。流式细胞术检测阳性细胞百分率降低至32.4%,差异有显著性。结论:靶向GFP的shRNA表达质粒能有效而特异抑制GFP在A549中的表达,A549细胞中存在RNA干扰现象。
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关 键 词: | RNA干扰 肺癌 绿色荧光蛋白 |
The inhibition of GFP expression in lung carcinoma cells by RNA interferencing |
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Abstract: | |
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Keywords: | |
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