内毒素耐受THP-1细胞中糖皮质激素受体-α在炎症反应中的作用 |
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作者姓名: | 杨朝晖 白祥军 李占飞 李波 杨帆 陈驾君 恩巴 |
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作者单位: | 华中科技大学同济医学院附属同济医院,创伤外科,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院,创伤外科,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院,创伤外科,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院,创伤外科,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院,创伤外科,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院,创伤外科,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院,创伤外科,武汉,430030 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目 |
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摘 要: | 目的:应用脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)刺激人单核细胞白血病细胞系THP-1细胞,模拟体外脓毒症模型,了解单核细胞系统在产生内毒素耐受时,糖皮质激素受体-α(Glucocorticoid receptor-α,GR-α)在转录水平上的表达。方法:用无血清培养基培养人THP-1细胞,将细胞随机分为4组(A、B、C、D),分别用不同浓度LPS刺激THP-1细胞24 h后,再改变LPS浓度刺激上述各组细胞24 h,分别提取RNA和蛋白质,以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测GR-α的mRNA表达,用西部印迹法(Western Blotting)检测NF-κB蛋白质表达,以酶联免疫吸附试验(ELISA)检测培养液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素1β(IL-1β),白细胞介素10(IL-10)水平。结果:A、B、C、D组GR-αmRNA与-βactin比值,NF-κB蛋白与GAPDH比值差异有统计学意义(P<0.01),在受到LPS刺激时,GR-αmRNA与NF-κB蛋白的表达负相关(r=0.816,P<0.01)。结论:内毒素耐受的THP-1细胞GR-α表达上调,这可能在THP-1细胞的内毒素耐受时炎症反应的发生起到重要作用。
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关 键 词: | 内毒素耐受 脓毒症 THP-1细胞 糖皮质激素受体 |
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