超声联合微泡介导神经营养因子-3基因转染神经干细胞实验研究 |
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引用本文: | 宫琳,陈芸,万圣祥,江长青,谭文,严飞,郑海荣. 超声联合微泡介导神经营养因子-3基因转染神经干细胞实验研究[J]. 中国超声医学杂志, 2012, 28(9) |
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作者姓名: | 宫琳 陈芸 万圣祥 江长青 谭文 严飞 郑海荣 |
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作者单位: | 1. 北京大学深圳医院超声科, 广东省深圳市,518036 2. 北京大学深圳医院显微手外科, 广东省深圳市,518036 3. 中国科学院深圳先进技术研究院生物医学与健康工程研究所保罗.C.劳特伯生物成像研究中心 |
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基金项目: | 深圳市科技计划重点项目 |
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摘 要: | 目的探讨体外利用超声联合微泡介导神经营养因子-3(neurotrophin-3,NT-3)基因转染神经干细胞的有效性和适宜超声参数。方法体外培养神经干细胞,在24孔板中加入200μl微泡(3×10~8/ml)和20μl pEGFP-NT 3基因重组质粒(1μg/μl),再加入500μl神经干细胞悬液(5×10~5/ml),在不同的超声条件下(声强分别为1、1.5、2 W/cm~2,照射时间分别为30、60、90、120、150 s),用1 MHz非聚焦探头辐照上述混合液,转染后在荧光显微镜下观察重组质粒转染效率,锥虫蓝染色检测神经干细胞活性。空白对照组为无超声辐照的质粒与神经干细胞的混合物。结果 (1)转染48 h后绿色荧光表达最强;(2)声强1.5 W/cm~2、照射时间60 s为本实验适宜的超声条件,此时神经干细胞基因转染率最高,且细胞活性较高。结论超声联合微泡介导NT 3基因转染神经干细胞具有可行性,为神经干细胞基因转染提供了新方法 。
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关 键 词: | 超声 微泡 神经营养因子-3 神经干细胞 基因转染 |
Experimental Study of Neurotrophin-3 Gene Transfected Into Neural Stem Cell by Ultrasound-mediated Microbubble Destruction |
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Abstract: | |
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Keywords: | |
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