六味地黄丸含药血清对Aβ诱导SH-SY5Y细胞的自噬影响及机制研究* |
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作者姓名: | 朱仲康 刘羽茜 王冰 张林 王艳杰 王哲 柳春 赵丹玉 |
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作者单位: | 辽宁中医药大学中西医结合学院 沈阳 110847,辽宁中医药大学中西医结合学院 沈阳 110847,辽宁中医药大学中西医结合学院 沈阳 110847,辽宁中医药大学中西医结合学院 沈阳 110847,辽宁中医药大学中西医结合学院 沈阳 110847,辽宁中医药大学中西医结合学院 沈阳 110847,辽宁中医药大学中西医结合学院 沈阳 110847,辽宁中医药大学中西医结合学院 沈阳 110847 |
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基金项目: | 国家自然科学基金委员会青年科学基金项目(81803854):基于中枢胰岛素抵抗探讨自噬失调对肾虚阿尔茨海默的影响及机制研究;辽宁省自然科学基金指导计划(20180551041):基于中枢胰岛素抵抗探讨自噬失调对肾虚阿尔茨海默的影响及机制研究 |
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摘 要: | 目的 研究六味地黄丸含药血清对Aβ诱导SH-SY5Y细胞的自噬影响及其机制,探讨阿尔茨海默病的病理机制及补肾填精法的作用机制。方法 30只大鼠随机分成对照组和六味地黄丸组两组,分别予以等量的双蒸水和含六味地黄丸粉末水溶液进行灌胃,末次灌胃结束后取血并分离血清备用。将SH-SY5Y细胞分为对照组、模型组和药物组,对照组和模型组给予含空白血清的完全培养液,药物组给予含含药血清的完全培养液,模型组和药物组加入Aβ1-42寡聚体,培养48 h。应用CCK-8法对各组进行细胞增殖率分析;免疫荧光法分析各组细胞内Aβ沉积情况;Western Blot法检测各组细胞BACE1、p62、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、Beclin1蛋白表达情况。结果 CCK-8结果显示,与对照组相比,模型组细胞增殖率显著降低(P<0.01);与模型组相比,药物组细胞增殖率显著增高(P<0.01)。与对照组相比,模型组细胞内Aβ的沉积显著增加(P<0.01);与模型组相比,药物组细胞内的Aβ沉积显著减少(P<0.01)。Western Blot结果显示,与对照组相比,模型组细胞的BACE1、Beclin1的蛋白表达量和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值显著升高(P<0.01),p62的蛋白表达量显著降低(P<0.01);与模型组相比,药物组细胞的Beclin1的蛋白表达量和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值显著升高(P<0.01),BACE1和p62的蛋白表达量显著降低(P<0.01)。结论 六味地黄丸含药血清可以增加Aβ诱导的SH-SY5Y细胞自噬相关基因的表达,上调自噬水平,减轻细胞损伤,对细胞具有明显的保护作用。
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关 键 词: | 阿尔茨海默病 自噬 Aβ 六味地黄丸 SH-SY5Y |
收稿时间: | 2021-04-27 |
修稿时间: | 2022-01-19 |
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