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siRNA干扰碱性成纤维细胞生长因子表达对肺腺癌A549增殖和克隆特性的影响
作者单位:;1.成都市第五人民医院呼吸内科;2.山东大学齐鲁医院肿瘤防治研究中心
摘    要:目的利用小分子RNA干扰碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达,探讨其对肺腺癌细胞A549增殖和克隆能力的影响。方法针对bFGF基因序列构建短发夹状siRNA真核表达载体,转染A549细胞,荧光显微镜下观察转染效率,采用Real Time-PCR检测观察bFGF-siRNA转染前后A549细胞bFGF mRNA表达变化,Western印迹法测OCT-4蛋白表达的变化。CCK-8比色实验及克隆形成实验分别观察A549细胞增殖和克隆能力的变化。结果特异性bFGF-siRNA能有效降低A549细胞中bFGF的mRNA水平(P<0.01),转染后A549细胞OCT-4表达下降(P<0.05),增殖和克隆能力均明显降低(各P<0.01)。结论靶向bFGF基因的短发夹状siRNA可以抑制bFGF表达;bFGF信号通路在在维持肺癌A549增殖和克隆特性、OCT-4表达上起重要作用。

关 键 词:RNA干扰  bFGF  肿瘤干细胞  增殖  克隆
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