SDF-1γ/rhGM-CSF融合蛋白的制备及其趋化作用 |
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作者姓名: | 居小萍 徐新颜 张晓青 刘永明 于春山 曹洋森 卢明智 陈樱 |
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作者单位: | 1. 第二军医大学长海医院放射治疗科,上海,200433 2. 中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所,上海,200032 |
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基金项目: | 上海市自然科学基金资助项目(No.06ZR14114),军队医学研究"十一五"计划课题资助项目(No.10MA004) |
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摘 要: | 目的:利用基因工程技术制备SDF-1与hGM-CSF的融合蛋白(SDF-1γ/rhGM-CSF),研究该融合蛋白对肿瘤患者造血和免疫功能的增强作用。方法:构建表达SDF-1γ/rhGM-CSF融合蛋白的pPIC9k-SDF1-rhGM-CSF1质粒,转染酵母菌,诱导SDF-1γ/rhGM-CSF融合蛋白的表达,Western blotting鉴定SDF-1γ/rhGM-CSF融合蛋白的表达。集落形成实验观察SDF-1γ/rhGM-CSF对骨髓细胞集落形成的影响,趋化实验检测其对未成熟树突状细胞(dendritic cell,DC)的趋化作用。结果:成功构建pPIC9k-SDF1-rhGM-CSF1质粒,高表达SDF-1γ/rhGM-CSF融合蛋白,分子量约为25 000,并可被GM-CSF特异性抗体所识别。SDF-1γ/rhGM-CSF融合蛋白能显著刺激骨髓细胞的集落形成,其效果强于GM-CSF(P<0.05)。与SDF-1相比,SDF-1γ/rhGM-CSF融合蛋白可更有效地趋化未成熟DC(P<0.05)。结论:SDF-1γ/rhGM-CSF融合蛋白可有效促进骨髓细胞的集落形成,趋化未成熟DC,有促进肿瘤化疗患者造血和免疫功能恢复的潜在临床应用前景。
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关 键 词: | SDF-1 GM-CSF 融合蛋白 肿瘤 造血 免疫 趋化 |
收稿时间: | 2011-04-10 |
修稿时间: | 2011-06-10 |
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