大鼠肺动脉平滑肌细胞原代培养及低氧对缺氧诱导因子- 1α的影响 |
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引用本文: | 李广,戴爱国.大鼠肺动脉平滑肌细胞原代培养及低氧对缺氧诱导因子- 1α的影响[J].肿瘤药学,2011(2):114-117. |
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作者姓名: | 李广 戴爱国 |
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作者单位: | [1]南华大学研究生院,湖南衡阳421001 [2]湖南省老年医院老年医学研究所呼吸疾病研究室,湖南长沙410016 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(编号:30570815,30270581); 湖南省自然科学基金(编号:05jj30073) |
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摘 要: | 目的获得活力稳定、高度纯化的体外培养大鼠血管平滑肌细胞,为肿瘤研究提供实验材料;并探讨低氧对抗肿瘤药物研究新靶点:缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的影响。方法无菌下取SD大鼠心肺组织,然后分离出肺动脉段,分离肺动脉中膜层,用组织块贴壁法培养,倒置相差显微镜观察细胞形态、普通免疫组织化学法(SP法)进行细胞鉴定。随后,将体外培养的大鼠PASMCs,设计常氧组、低氧组H2,H6,H12,H24,用Western blotting法检测HIF-1α的蛋白表达。结果用组织贴块法成功培养大鼠PASMCs,得到生长稳定、纯度高的PASMCs,且培养与纯化可以同时进行,可获得稳定传代的细胞;HIF-1α蛋白在常氧组有少量表达,在低氧条件下,其表达明显增加。结论成功建立体外大鼠肺动脉平滑肌细胞原代培养模型;低氧条件下促进其中HIF-1α的表达;这提示HIF-1α蛋白的表达可能是肿瘤细胞适应缺氧环境的重要原因。
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关 键 词: | 平滑肌细胞 大鼠 肿瘤 缺氧诱导因子-1α |
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