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Fn、TPO基因修饰对人骨髓间充质干细胞的影响
引用本文:张磊,于洁,莫姝,杨光,李欣,宪莹,金先庆.Fn、TPO基因修饰对人骨髓间充质干细胞的影响[J].中华血液学杂志,2007,28(12):832-836.
作者姓名:张磊  于洁  莫姝  杨光  李欣  宪莹  金先庆
作者单位:1. 重庆医科大学附属儿童医院血液科,400014
2. 重庆医科大学附属儿童医院儿科研究所,400014
基金项目:国家自然科学基金(30100095)
摘    要:目的 观察纤维连接蛋白(Fn)、血小板生成素(TPO)融合基因修饰对人骨髓间充质干细胞(MSC)的影响.方法 构建携带Fn-TPO融合基因的重组逆转录病毒载体,并以其对骨髓MSC进行基因修饰;观察Fn-TPO基因在骨髓MSC中的表达,以及基因修饰后骨髓MSC的体外增殖、黏附造血细胞和分泌TPO的能力;并将脐血CD34+细胞接种到基因修饰后骨髓MSC形成的滋养层,培养7d观察修饰后骨髓MSC对造血细胞体外扩增和集落形成能力的影响.结果 成功构建携带Fn-TPO基因的重组逆转录病毒载体且以该逆转录病毒载体对骨髓MSC进行体外基因修饰;Fn、TPO基因在骨髓MSC内能够正常转录;基因修饰后的骨髓MSC体外增殖能力(6.92±0.77)×104/ml]与对照组(7.18±0.89)×104/ml]比较差异无统计学意义(P>0.05);基因修饰组和对照组黏附造血细胞能力分别为0.188±0.018和0.167±0.017(P<0.01),分泌TPO能力分别为(7.46±0.59)ng/ml和(5.58±0.37)ng/ml(P<0.01),细胞分泌TPO的能力不受培养时间的影响,但受细胞生长状态影响;2×104脐血CD34+造血干/祖细胞经基因修饰后骨髓MSC联合必要细胞因子体外扩增7 d,有核细胞数、CD34+细胞比例、BFU-E、CFU-GM及CFU-GEMM分别为(29.9±2.7)×104、(33.3±2.8)%、109.3±4.1/1×104CD34+细胞、163.7±7.1/1×104CD34+细胞、13.3±1.5/1×104CD34+细胞,较对照组明显增加(P<0.01).结论 Fn-TPO基因修饰能够增强骨髓MSC黏附造血细胞、分泌TPO及支持脐血CD34+细胞扩增的能力.

关 键 词:骨髓间充质干细胞  造血干细胞  纤维连接蛋白  血小板生成素  基因修饰
收稿时间:2006-08-21

Effect of fibronectin-thrombopoietin gene modification on human bone marrow mesenchymal stem cells
ZHANG Lei,YU Jie,MO Shu,YANG Guang,LI Xin,XIAN Ying,JIN Xian-qing.Effect of fibronectin-thrombopoietin gene modification on human bone marrow mesenchymal stem cells[J].Chinese Journal of Hematology,2007,28(12):832-836.
Authors:ZHANG Lei  YU Jie  MO Shu  YANG Guang  LI Xin  XIAN Ying  JIN Xian-qing
Institution:Department of Hematology, Children's Hospital, Chongqing Medical University, Chongqing 400014, China.
Abstract:
Keywords:Mesenchymal stem cells  Hematopoietic stem cells  Fibronectin  Thrombopoietin  Gene modification
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