| 人p27kip1基因的克隆及其真核表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 吴芃,郑少斌,谭万龙,左翼.人p27kip1基因的克隆及其真核表达载体的构建[J].热带医学杂志,2008,8(4):285-288. |
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| 作者姓名： | 吴芃 郑少斌 谭万龙 左翼 |
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| 作者单位： | 南方医科大学南方医院泌尿外科,广州,510515 |
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| 摘 要： | 目的 克隆人p27kipl,基因并构建其真核表达载体,为进一步研究其功能奠定基础.方法 根据p27kip1已知序列设计引物,分别在上下游引入Mlu I和Spe I酶切位点,从人肾脏组织中提取总RNA,经逆转录PCR得到cDNA,亚克隆入携带GFP报告基因的pWPXL真核载体中,经筛选获得正确的克隆,并通过双酶切凝胶电泳及测序鉴定.将成功构建的质粒在脂质体介导下转染肾癌786-0细胞,并通过RT-PCR及Western-blot检测表达情况.结果 克隆了人p27kip1基因,与GenBank中序列比对无误;真核表达载体经酶切鉴定表明为正确重组子,成功构建了真核表达载体.转染肾癌786-0细胞48 h后,p27kip1蛋白出现高表达.结论 成功克隆了p27kip1基因,构建了其真核表达载体并在肾癌细胞中成功表达,为p27kip1在肾肿瘤中的进一步研究提供了工作基础.
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| 关 键 词： | p27kip1 基因表达 分子克隆 人 |
| 文章编号： | 1672-3619(2008)04-0285-03 |
| 修稿时间： | 2007年12月6日 |
Cloning of Human p27kip1 Gene and Construction of Its Eukaryotic Expression Vector |
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| WU Peng,ZHENG Shao-bin,TAN Wan-long,ZUO Yi.Cloning of Human p27kip1 Gene and Construction of Its Eukaryotic Expression Vector[J].Journal Of Tropical Medicine,2008,8(4):285-288. |
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| Authors: | WU Peng ZHENG Shao-bin TAN Wan-long ZUO Yi |
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