| 小鼠白细胞介素10重组腺病毒载体构建及对树突状细胞的基因修饰 |
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| 引用本文： | 许飞,陈传辉,林耀广,张伟. 小鼠白细胞介素10重组腺病毒载体构建及对树突状细胞的基因修饰[J]. 中国组织工程研究与临床康复, 2010, 14(5). DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2010.05.021 |
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| 作者姓名： | 许飞 陈传辉 林耀广 张伟 |
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| 作者单位： | 南昌大学第一附属医院呼吸内科,江西省南昌市,330006 |
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| 摘 要： | 背景:对于抗原递呈细胞树突状细胞及其分泌的细胞因子白细胞介素10在气道高反应性和炎症中的作用国内外文献报道较少.目的:构建小鼠白细胞介素10腺病毒重组体Ad-mIL-10,获得小鼠白细胞介素10基因修饰的树突状细胞,以期为下一步基因治疗的动物实验打下基础.方法:通过人工合成获得小鼠白细胞介素10基因,根据白细胞介素10基因序列及腺病毒载体的多克隆位点,合成包括酶切位点的基因序列,连接到pMD18-T载体并测序鉴定.用基因工程的方法将小鼠白细胞介素10基因克隆到BDAdeno-X~(TM)腺病毒载体,于人胚肾293细胞中包装、扩增病毒并测定白细胞介素10蛋白表达,转染到体外培养的小鼠骨髓来源的树突状细胞.结果与结论:成功构建了小鼠Ad-mIL-10重组腺病毒载体并高包装、扩增成功,测定高表达白细胞介素10蛋白,体外成功培养小鼠骨髓来源的小鼠树突状细胞并顺利转染Ad-mIL-10.提示用基因工程方法构建小鼠Ad-mIL-10重组腺病毒载体并转染小鼠骨髓来源的树突状细胞是可行的,可为进行相关基因治疗的可能性提供更充足的理论依据.
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| 关 键 词： | 白细胞介素10基因 小鼠 重组腺病毒 树突状细胞 基因修饰 |
Construction of mouse interleukin-10 recombinant adenovirus vector and gene modification for dendritic cells |
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| Xu Fei,Chen Chuan-hui,Lin Yao-guang,Zhang Wei. Construction of mouse interleukin-10 recombinant adenovirus vector and gene modification for dendritic cells[J]. Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research, 2010, 14(5). DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2010.05.021 |
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| Authors: | Xu Fei Chen Chuan-hui Lin Yao-guang Zhang Wei |
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| Affiliation: | Xu Fei,Chen Chuan-hui,Lin Yao-guang,Zhang Wei Department of Respiratory Medicine,First Affiliated Hospital of Nanchang University,Nanchang 330006,Jiangxi Province,China |
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| Abstract: | BACKGROUND:Few reports concern the effects of dendritic cells-a kind of antigen presenting cells,and interleukin-10(IL-10) on airway hyperreactivity or inflammation.OBJECTIVE:To construct mice IL-10 recombinant adenovirus vector Ad-mIL-10 to acquire the dendritic cells modified by mIL-10,which can provide a foundation for the further study.METHODS:Mouse IL-10(mIL-10) gene comprise of enzyme cutting spot was synthesized according to the mIL-10 gene sequence and multiclone spot of adenovirus vector,connected ... |
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