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| 日本血吸虫Toll样受体相互作用蛋白 基因的克隆 表达及鉴定 | |
| 作者姓名： | Wang XN Xu B Feng Z Wang XN Hu W |
| 作者单位： | 1. 华东理工大学生物工程学院,上海200237;中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所,卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室,世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心 2. 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所,卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室,世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心 3. 华南理工大学生物科学与工程学院 |
| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(2007AA02Z153); 国家科技重大专项(2009ZX10004-302) |
| 摘 要： | 目的克隆、表达日本血吸虫Toll样受体相互作用蛋白（SjTollip）基因,并研究该基因在日本血吸虫各虫期的转录表达情况。方法从日本血吸虫cDNA文库中挑出Toll样受体相互作用蛋白基因进行体外扩增,并克隆入原核表达载体pET-28a,转化大肠埃希菌BL21（DE3）,异丙基-β-D硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达,用组氨酸标签亲和层析法纯化表达产物。制备日本血吸虫各虫期阶段总RNA和重组SjTollip蛋白免疫新西兰白兔的免疫兔血清,利用RT-PCR和蛋白质免疫印迹分析SjTollip基因在日本血吸虫各期转录表达的差异及重组SjTollip蛋白的免疫原性。结果构建了重组原核表达载体SjTollip/pET-28a,诱导获得以包涵体形式表达的不可溶重组蛋白,相对分子质量约为24000,与预测的融合蛋白相对分子质量相符。纯化后的重组蛋白rSjTollip可被日本血吸虫感染兔血清识别。虫期转录特异性分析显示,该基因在尾蚴和雄虫中转录水平较低。免疫印迹分析结果显示,在虫卵、尾蚴、童虫、雄虫、雌虫各发育阶段都检测到该蛋白,但童虫和雌虫中表达水平明显升高。结论 SjTollip基因在日本血吸虫各发育阶段转录表达水平有较大差异,其有可能成为潜在的日本血吸虫病疫苗候选抗原和药物及诊断靶点。 |
| 关 键 词： | 日本血吸虫 Toll样受体相互作用蛋白 虫期特异性 克隆 表达 鉴定 |
Cloning, expression and identification of Toll like receptor interacting protein gene of Schistosoma japonicum |
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| Wang XN,Xu B,Feng Z,Wang XN,Hu W.Cloning, expression and identification of Toll like receptor interacting protein gene of Schistosoma japonicum[J].Chinese Journal of Schistosomiasis Control,2011,23(4):406-411. | |
| Authors: | Wang Xiao-Na Xu Bin Feng Zheng Wang Xiao-Ning Hu Wei |
| Institution: | Wang Xiao-na~1,2,Xu Bin~2,Feng Zheng~ 2,Wang Xiao-ning~ 3,Hu Wei ~2* 1 School of Biotechnology,East China University of Science and Technology,Shanghai 200237,China,2 National Institute of Par-asitic Diseases,Chinese Center for Disease Control and Prevention,Key Laboratory of Parasite and Vector Biology,Ministry of Health,WHO Collaborating Centre for Malaria,Schistosomiasis and Filariasis,3 School of Biosciences & Bioengineering,South China University of Technology |
| Abstract: | |
| Keywords: | Schistosoma japonicum Toll like receptor interacting protein Stage specificity Cloning Expression Identification |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 PubMed 等数据库收录！ | |
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