骨髓基质细胞条件液联合神经干细胞移植对帕金森病大鼠行为认知功能的影响：效果优于单纯神经干细胞移植吗？

背景：将骨髓基质细胞和神经干细胞分别单独移植于帕金森病模型鼠脑内已取得良好效果，但尚未见联合移植的报道。目的：观察骨髓基质细胞条件液与神经干细胞联合移植对帕金森病模型大鼠行为认知功能的影响，并与单纯神经干细胞移植效果进行比较。方法：用Neurobasal+B27培养3~6代的骨髓基质细胞24 h后，收集并离心上清液，即为骨髓基质细胞条件液。体外分离培养大鼠神经干细胞后，行BrdU标记。55只大鼠随机取8只作为正常组，剩余47只采用立体定向仪单侧黑质致密部和腹侧被盖区注射6-羟基多巴胺建立帕金森病动物模型。32只造模成功，随机分为3组，选取右侧纹状体两个坐标点为移植点，单纯神经干细胞组每点注入神经干细胞悬液5 μL，联合组每点注入神经干细胞悬液+骨髓基质细胞条件液5 μL，模型组不注入任何液体。观察帕金森病大鼠旋转行为的改变，通过水迷宫试验对大鼠认知功能进行评价，免疫组织化学染色检测黑质区酪氨酸羟化酶蛋白的表达及移植区BrdU的表达。结果与结论：与模型组比较，移植后1~8周单纯神经干细胞组、联合组大鼠旋转次数均显著减少(P < 0.01)，移植后第4，8周单纯神经干细胞组、联合组大鼠逃避潜伏期均明显缩短(P < 0.05)，在平台象限的游泳时间百分比、游泳距离百分比、穿越平台次数均明显增加(P < 0.05)；后2组间各指标比较均无明显差异(P > 0.05)。移植后第8周，各组大鼠6-羟基多巴胺注射侧黑质区酪氨酸羟化酶阳性神经元和神经纤维表达基本缺失；单纯神经干细胞组、联合组移植区可见一定数量的BrdU阳性细胞表达，多数位于针道附近，部分细胞沿胼胝体迁移。提示骨髓基质细胞条件液与神经干细胞联合移植能改善帕金森病模型大鼠的旋转行为和认知能力，与单纯神经干细胞纹状体移植的效果基本相似。