初发2型糖尿病患者早期内皮祖细胞生物学功能的变化及其意义

目的观察初发2型糖尿病（T2DM）患者外周血内皮祖细胞（EPC）黏附和迁移及血管生成能力的改变，探讨EPC在T2DM血管病变发生、发展中的可能作用。方法取20例初发T2DM（T2DM组）无血管并发症患者、20例健康体检者（正常对照组）外周血EPC培养，用密度梯度离心法从外周血获取单个核细胞，接种在培养板内，培养7d后对贴壁细胞进行细胞鉴定和部分生物学功能分析。激光共聚焦显微镜鉴定FITC标记荆豆凝血素-I（FITC-UEA-I）和DiI标记的乙酰化低密度脂蛋白（Dil-ac-LDL）双染色阳性细胞为正在分化的EPC。胰蛋白酶消化后计数贴壁细胞观察EPC黏附能力；改良的Boyden小室测定观察EPC的迁移能力；体外血管生成实验观察EPC体外血管生成能力。RT-PCR检测EPC eNOS mRNA表达水平，western blot检测EPC eNOS蛋白表达水平，硝酸酶还原法检测EPCNO分泌。结果与正常对照组比较，T2DM组黏附、迁移细胞数均显著减少（P〈0.05或P〈0.01），NO水平显著下降（P〈0.05）。RT-OCR检测结果显示，T2DM组eNOS mRNA表达水平为0.34±0.02，正常对照组为0.48±0.04，2组比较差异有统计学意（P〈0.05）。western blot检测结果显示，T2DM组EPC eNOS蛋白表达水平为0.36±0.19，正常对照组为0.49±0.16，2组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论初发T2DM患者外周血EPC部分生物学功能明显受损，黏附、迁移及体外血管生成能力显著减退，EPCNO合成减少，可能与T2DM患者EPC血管生成能力受损有关。EPC的生物学功能异常或许可作为初发T2DM患者血管病变发生、发展的一个早期生物学标志物。

Changes in Biological Function of Human Endothelial Progenitor Cell in Newly Developed Type 2 Diabetics and Its Significance

Objective In this paper,the changes of migration,adhesion and in vitro vasculogenesis activity of circulating endothelial progenitor cells(EPC) in newly developed type 2 diabetes mellitus(T2DM) were observed,so as to explore the possible effect of EPC on generating and developing of vascular disease of T2DM.Methods EPCs were isolated from human peripheral blood of 20 cases of newly developed type 2 diabetes(T2DM group) and 20 age-matched healthy people(normal control group).Mononuclear cells from peripheral...