| miRNA慢病毒表达载体的构建及其在原代培养的大鼠胚胎大脑皮层神经细胞中的稳定表达 |
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| 引用本文： | 刘伊宁,李晓苗,来雯婷,吉别克·瓦提别克,美丽吾尔提·达吾列提汗,沙亚哈提·别尔克哈之,李卉,李颖,刘玲.miRNA慢病毒表达载体的构建及其在原代培养的大鼠胚胎大脑皮层神经细胞中的稳定表达[J].神经解剖学杂志,2016(6):769-773. |
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| 作者姓名： | 刘伊宁 李晓苗 来雯婷 吉别克·瓦提别克 美丽吾尔提·达吾列提汗 沙亚哈提·别尔克哈之 李卉 李颖 刘玲 |
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| 作者单位： | 1. 新疆医科大学 基础医学院,乌鲁木齐,830011;2. 新疆医科大学 中心实验室,乌鲁木齐,830011 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(81460359) |
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| 摘 要： | 目的:构建miRNA的慢病毒表达载体,使其在原代培养的大鼠胚胎大脑皮层神经细胞中稳定表达。方法:将该干扰片段构建入慢病毒载体(pL KD-Ubc-eG FP-U6-shRNA)的U6启动子下游,该载体可以实现在干扰小片段RNA的同时表达绿色荧光蛋白EGFP基因,便于观察载体工作状态。通过脂质体转染法转染原代培养的大鼠胚胎大脑皮层神经细胞,观察转染的原代培养的大鼠胚胎大脑皮层神经细胞的形态及表达情况。结果:针对筛选的miRNA构建的慢病毒载体,经过DNA测序结果和琼脂糖凝胶电泳鉴定成功构建了筛选的miRNA的慢病毒表达载体,重组质粒转染原代培养的大鼠胚胎大脑皮层神经细胞,经24 h后在荧光倒置显微镜下可以观察到部分细胞带有绿色荧光,筛选的miRNA构建的慢病毒载体在原代培养的大鼠胚胎大脑皮层神经细胞中稳定表达。结论:筛选的miRNA的慢病毒表达载体构建成功,并稳定的转染到原代培养的大鼠胚胎大脑皮层神经细胞中,为miRNA对神经细胞存活功能的研究提供了平台。
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| 关 键 词： | 大脑皮层神经细胞 慢病毒表达载体 miRNA NOIG-17 EGFP 大鼠 |
Construction and stable expression of miRNA lentivirus expression vector in primary cultured rat embryos cortical neurons |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | cortical neurons lentivirus expression vector miRNA NOIG-17 EGFP rat |
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