体外心肌微环境下益气活血化瘀方药诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的研究?

目的探讨体外心肌微环境下不同治法方药诱导骨髓间充质干细胞(BMSC)向心肌样细胞分化的差异性。方法 40只成年SD大鼠随机分为活血化瘀组、益气活血组、益气组、空白组,给相应药物后制备含药血清;另再从60只正常SD大鼠提取、培养及分离纯化BMSC;同时提取、培养SD新生鼠心肌细胞,建立体外模拟大鼠心肌微环境模型。用MTT法选择各给药组的最佳倍比浓度;流式细胞仪检测BMSC中CD105阳性细胞(CD105+-BMSC)分裂增殖情况;免疫细胞化学法检测心肌肌钙蛋白T(CTNT)、心肌细胞转录因子4(GATA-4)分化情况;免疫荧光技术检测心肌特异性肌球蛋白重链(MHC)表达。结果各用药组CD105+-BMSC的群体倍增时间为24 h,活血化瘀组的细胞数于第2天开始明显高于其他用药组和对照组且呈持续状态。活血化瘀组除第1天外各时间点的增殖指数均为最高值,分裂代次明显多于其他组。第2、3、4、5天,活血化瘀组、益气活血组、益气组的MHC、CTNT和GATA-4表达量比空白组明显增加(P0.05);活血化瘀组明显优于益气活血组、益气组(P0.05);益气组与益气活血组差别无统计学意义(P0.05)。结论在体外模拟心肌微环境的条件下,活血化瘀法与益气活血法、益气法均有促进CD105+-BMSC分裂并向心肌样细胞分化的作用,其中活血化瘀法效果最为明显。