摘 要: | 我们采用改进的胶原酶灌注技术 ,获取分离的成人肝细胞 ,并研究威斯康星 (UW )保存液对细胞活力和ATP贮存的影响 ,现将结果报道如下。一、材料与方法1.主要试剂 :Ⅱ型胶原酶、透明质酸酶、DNA酶I、4 2 羟乙基 1哌嗪乙磺(HEPES)均购自Sigma公司 ,离解酶(Dispase)Ⅱ型购自Boehringer公司 ,小牛血清为Gibco产品。2 .分离方法 :成人肝脏取自脑死亡供体 ,采用腹部多器官联合快速切取技术获取 ,UW液低温灌洗。切取灌洗较好的肝叶组织 60~ 80g(1个切面 ,保留3~ 4支血管行插管 ) ,UW液 0~ 4℃保…
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