| 人ω干扰素在巴斯德毕赤酵母中的表达及纯化 |
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| 引用本文： | 齐连权,付玲,于长明,于婷,徐春娥,王海涛,陈薇. 人ω干扰素在巴斯德毕赤酵母中的表达及纯化[J]. 军事医学科学院院刊, 2003, 27(4): 268-270 |
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| 作者姓名： | 齐连权 付玲 于长明 于婷 徐春娥 王海涛 陈薇 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院微生物流行病研究所,北京,100071 |
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| 摘 要： | 目的 :在巴斯德毕赤酵母中表达及纯化人ω干扰素 (interferonω ,IFN_ω)以对其功能进行深入研究。方法 :用PCR方法扩增人IFN_ω基因 ,与分泌型酵母表达载体pMEX9K重组 ,经酶切、PCR和序列测定证实重组表达载体pMEX9Kω构建正确。将重组载体pMEX9Kω用SalⅠ酶切后 ,转化毕赤酵母GS115。得到的转化子经诱导表达后在发酵上清中有人IFN_ω的表达 ,表达量为 4× 10 9U L。经过ButylSepharose 4FF疏水层析柱 ,SPSepharoseFF离子交换柱和Superdex 75凝胶过滤三步层析纯化 ,利用反相HPLC分析纯化的重组蛋白。结果 :得到了纯度 >99%的重组IFN_ω。N端氨基酸序列测定表明重组人IFN_ω具有正确的N端氨基酸残基顺序 ,相对分子质量为 2 2 0 0 0 ,并具有同天然蛋白相似的比活性。结论 :在毕赤酵母中成功地表达并纯化得到了同天然蛋白具有相似的比活性的人IFN_ω。
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| 关 键 词： | ω干扰素 毕赤酵母 基因表达 纯化 |
| 文章编号： | 1000-5501(2003)04-0268-03 |
| 修稿时间： | 2002-11-11 |
Expression and purification of human interferon ω in yeast Pichia pastoris |
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| QI Lian_Quan,FU Ling,YU Chang_Ming,YU Ting,XU Chun_E,WANG Hai_Tao,CHEN Wei. Expression and purification of human interferon ω in yeast Pichia pastoris[J]. Bulletin of the Academy of Military Medical Sciences, 2003, 27(4): 268-270 |
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| Authors: | QI Lian_Quan FU Ling YU Chang_Ming YU Ting XU Chun_E WANG Hai_Tao CHEN Wei |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | interferon omega Pichia pastoris gene expression |
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