| 幽门螺杆菌hpaA核酸疫苗的构建及免疫原性检测 |
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| 引用本文： | 徐灿,李兆申,屠振兴,许国铭,杜奕奇,孙波,杨骅,龚燕芳,金晶,吴红玉. 幽门螺杆菌hpaA核酸疫苗的构建及免疫原性检测[J]. 中华消化杂志, 2004, 24(10): 579-582 |
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| 作者姓名： | 徐灿 李兆申 屠振兴 许国铭 杜奕奇 孙波 杨骅 龚燕芳 金晶 吴红玉 |
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| 作者单位： | 200433,上海,第二军医大学长海医院消化科 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(30170427) |
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| 摘 要： | 目的 构建含幽门螺杆菌(Hp)hpaA基因的核酸疫苗。方法 抽提Hp标准菌株CCUG17874基因组DNA，应用聚合酶链式反应(PCR)技术从基因组DNA扩增hpaA基因，克隆入pUCmT载体，检测hpaA基因序列，经过一系列酶切、连接反应将其克隆入真核表达载体plRES，转入大肠杆菌，筛选阳性克隆，通过PCR和酶切反应鉴定。通过脂质体法将构建好的重组载体pIRES-hpaA转染COS-7细胞，SDS-PAGE及Western印迹法检测pIRES-hpaA表达HpaA蛋白的免疫原性。结果 成功扩增出长约750bp的hpaA基因．测序结果表明扩增出的hpaA基因与Hp hpaA序列一致，PCR和酶切鉴定结果证实hpaA基因克隆入真核表达载体pIRES，成功构建了含hpaA基因的Hp核酸疫苗pIRES-hpaA，并经Western印迹法检测到特异性蛋白条带。结论 构建了hpaA基因的Hp核酸疫苗，为进一步探索其免疫作用奠定了基础。
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| 关 键 词： | hpaA基因 IRES 核酸疫苗 免疫原性 Western印迹法 幽门螺杆菌 真核表达载体 酶切 阳性克隆 基因组DNA |
| 修稿时间： | 2004-02-06 |
Construction of Helicobacter pylori hpaA nucleic acid vaccine and detection of its immunogenicity |
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| XU Can,LI Zhao shen,TU Zhen xing,et al.. Construction of Helicobacter pylori hpaA nucleic acid vaccine and detection of its immunogenicity[J]. Chinese Journal of Digestion, 2004, 24(10): 579-582 |
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| Authors: | XU Can LI Zhao shen TU Zhen xing et al. |
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| Affiliation: | XU Can,LI Zhao shen,TU Zhen xing,et al. Department of Gastroenterology,Changhai Hospital,Second Military Medical University,Shanghai 200433,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Helicobacter pylori Vaccine Vector |
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