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| 免疫磁珠分选骨髓衍生肝干细胞亚群c-Kit+lin- | |
| 引用本文： | 张春兴,廖彩仙,张守华,苏俊,周杰,朱槿,肖菊花. 免疫磁珠分选骨髓衍生肝干细胞亚群c-Kit+lin-[J]. 中国组织工程研究与临床康复, 2007, 11(7) |
| 作者姓名： | 张春兴 廖彩仙 张守华 苏俊 周杰 朱槿 肖菊花 |
| 作者单位： | 1. 南方医科大学南方医院肝胆外科,广东省广州市,510515 2. 宿迁市中心血站,江苏省宿迁市,223800 3. 南昌大学医学院第一附属医院超声科,江西省南昌市,330006 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金;广东省自然科学基金 |
| 摘 要： | 目的:利用免疫磁性细胞分选系统分离纯化骨髓衍生肝干细胞亚群c-Kit lin-。方法:实验于2006-07/08在南方医科大学实验动物中心完成。6～8周龄的SPF级纯系BALB/C雄性小鼠10只,体质量18～20g。收集小鼠股骨骨髓细胞,利用免疫磁性细胞分选系统,通过两步法分选纯化c-Kit lin-:将获取的lin-细胞悬液8℃条件下1500r/min离心10min,弃上清,按80μL/107加入Buffer重悬细胞。按20μL/107加生物素抗体磁珠,混匀,4℃冰箱孵育15min,按1mL/107加入Buffer洗细胞1次,8℃条件下1500r/min离心10min,弃上清,按500μL/108加入Buffer重悬细胞。Buffer500μL润MS柱,悬液过柱后,Buffer500μL/次洗柱3次,柱子脱离磁场,加1mLBuffer,用配套柱塞推出柱中的c-Kit lin-细胞,收集到c-kit lin-细胞,细胞计数。取2.0×106个细胞分成10等份,流式细胞仪分析c-Kit lin-细胞纯度,计算回收率,评估纯化效率,苔盼兰染色检测纯化前后的细胞活力。计算活细胞的百分率。细胞纯度和细胞回收率的计算:细胞纯度=分离产物中的阳性细胞数/分离细胞的总细胞数×100%,细胞回收率=分离产物中的阳性细胞数/起始标本阳性细胞总数×100%。结果:10只小鼠均进入结果分析。利用免疫磁性细胞分选系统分选出的骨髓衍生肝干细胞亚群c-Kit lin-细胞纯度和回收率分别为(77.98±2.34)%,75.40%,纯化前后细胞活力不受影响。结论:免疫磁性细胞分选系统能有效分选骨髓衍生肝干细胞亚群c-Kit lin-,纯度和回收率高,且不影响细胞活力。 |
| 关 键 词： | 骨髓 肝细胞/代谢 干细胞 免疫磁珠 |
Purification of c-Kit+lin- cells from murine bone marrow by magnetic activated cell sorting |
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| Zhang CX,Liao CX,Zhang SH,Su J,Zhou J,Zhu J,Xiao JH. Purification of c-Kit+lin- cells from murine bone marrow by magnetic activated cell sorting[J]. Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research, 2007, 11(7) | |
| Authors: | Zhang CX Liao CX Zhang SH Su J Zhou J Zhu J Xiao JH |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
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