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| 碱性成纤维细胞生长因子真核表达载体的构建及其在内耳基因治疗中的实验研究 | |
| 引用本文： | 时利,董明敏,时文杰,胡吟燕,郭维,翟所强,杨伟炎. 碱性成纤维细胞生长因子真核表达载体的构建及其在内耳基因治疗中的实验研究[J]. 中华耳鼻咽喉头颈外科杂志, 2003, 38(1): 21-23 |
| 作者姓名： | 时利 董明敏 时文杰 胡吟燕 郭维 翟所强 杨伟炎 |
| 作者单位： | 1. 100853,北京,解放军总医院耳鼻咽喉科研究所 2. 郑州大学医学院第一临床医院耳鼻咽喉科 3. 天津第一中心医院 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金 (30 1710 0 5 )，北京自然科学基金(70 2 2 0 36) |
| 摘 要： | 目的 观察碱性成纤维细胞生长因子 (basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)双顺反子真核表达载体在豚鼠耳蜗中的表达 ,及噪声损伤后对毛细胞的保护作用。方法 利用脑炎心肌炎病毒的内部核糖体进入位点 (internalribosomeentrysite,IRES) ,构建人bFGF与增强型绿色荧光蛋白 (enhancegreenfluorescenceprotein ,EGFP)基因真核表达载体pIRES bFGF EGFP。采用硬脂胺 (stearylamine ,SA)脂质体介导bFGF基因转染豚鼠内耳 ,噪声暴露即刻通过圆窗向豚鼠耳蜗注入含有bFGF基因作为治疗基因的真核表达载体 ;或在噪声暴露前 7d ,作为保护因子转导转染豚鼠耳蜗。结果 构建的pIRES bFGF EGFP在转染 2 4h后开始表达 ,48h达到最高 ,表达时间可持续 1个月。治疗组在噪声后听性脑干反应平均阈值均低于噪声组 ,在保护组 :pIRES bFGF EGFP对耳蜗毛细胞有明显的保护作用。结论本研究成功地构建了pIRES bFGF EGFP真核共表达载体 ,具有bFGF、EGFP的双重活性 ,IRES可引导外源基因bFGF在内耳毛细胞表达 |
| 关 键 词： | 荧光抗体技术 成纤维细胞生长因子 碱性 基因表达 噪声 |
| 修稿时间： | 2002-03-14 |
Construction of bicistronic eukaryotic vector containing basic fibroblast growth factor and study of their functions in gene therapy for hearing impairment |
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| Abstract: | |
| Keywords: | Fluorescent antibody technique Fibroblast growth factor basic Gene expression Noise |
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