| 抗膀胱癌单抗Fab段基因的克隆及表达 |
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| 引用本文： | 周丽君,王 琰,白 银,张海荣,余莉章. 抗膀胱癌单抗Fab段基因的克隆及表达[J]. 中国肿瘤生物治疗杂志, 2002, 9(2): 117-121 |
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| 作者姓名： | 周丽君 王 琰 白 银 张海荣 余莉章 |
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| 作者单位： | 1. 海军总医院中心实验科,北京,100037
2. 北京大学第一临床医院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(30070706)资助 |
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| 摘 要： | 目的：克隆抗膀胱癌单抗BDI的Fab段基因并在大肠杆菌中表达。方法：用逆转录－聚合酶链反应技术（RT－PCR），从分泌抗人膀胱癌的鼠单抗杂交瘤细胞系中克隆k链和Fd段基因，克隆到Fab表达载体中，在大肠杆菌表达噬菌体抗体和可溶Fab；运用PCR介导的定位点突变改造VH氨基端序列；用ELISA、免疫组化法等进行特异性鉴定。结果：从分泌抗膀胱癌的鼠单抗杂交瘤细胞系中克隆了重链Fd段和k链基因，在大肠杆菌中获得有抗原结合活性的噬菌体抗体和可溶性Fab的表达，但活性很弱，将VH氨基端序列矫正为亲本单抗原始序列后，明显改善了其活性，通过ELISA、免疫组化及模拟抗体库筛选证实了所获抗体片段的特异性结合及在抗体库技术中的可用性。结论：获得了功能性抗膀胱癌小分子抗体，并再次提示抗体氨基端序列对抗体活性的影响的重要性。
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| 关 键 词： | 克隆 表达 抗膀胱癌单抗 免疫球蛋白可变区基因 Fab 膀胱癌 |
| 文章编号： | 1007-385X(2002)02-0117-05 |
| 收稿时间： | 2001-12-03 |
| 修稿时间： | 2001-12-03 |
Cloning of Fab Gene of an Anti-Human Bladder Cancer Monoclonal Antibody and Its Expression in E.coli |
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| ZHOU Li-jun,WANG Yan,BAI Yin,ZHANG Hai-rong and YU Li-zhang. Cloning of Fab Gene of an Anti-Human Bladder Cancer Monoclonal Antibody and Its Expression in E.coli[J]. Chinses Journal of Cancer Biotherapy, 2002, 9(2): 117-121 |
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| Authors: | ZHOU Li-jun WANG Yan BAI Yin ZHANG Hai-rong YU Li-zhang |
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| Affiliation: | Navy General Hospital, Beijing 100037, China;Navy General Hospital, Beijing 100037, China;Navy General Hospital, Beijing 100037, China;Navy General Hospital, Beijing 100037, China;Navy General Hospital, Beijing 100037, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Fab |
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