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盐析法快速提取口腔拭子DNA
引用本文:朱伟锋,罗达亚,涂硕,张霞丽,揭克敏,万福生.盐析法快速提取口腔拭子DNA[J].第二军医大学学报,2011,32(12):1370-1375.
作者姓名:朱伟锋  罗达亚  涂硕  张霞丽  揭克敏  万福生
作者单位:南昌大学医学院生物化学与分子生物学教研室,南昌,330006
基金项目:国家自然科学基金(30860319), 江西省科技支撑计划 (2009BSB09502).
摘    要:目的建立盐析法快速从口腔拭子中提取基因组DNA的方法。方法首先以细胞裂解液和蛋白酶K消化口腔上皮细胞,然后用5 mol/L NaCl沉淀蛋白质,用异丙醇沉淀DNA,最后用70%乙醇洗涤得到的DNA并将其溶于TE(10mmol/L Tris-HCl,1 mmol/L EDTA,pH 8.0)中。用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术对TP53基因的rs1042522和CHRNA3基因的rs12910984位点进行分型。对不同基因型的样本测序验证。结果单支口腔拭子提取得到的DNA量在0.68~2.56μg之间,D260/D280比值在1.77~1.94之间。经PCR扩增和酶切消化,10个样本的两个单核苷酸多态性都得到了清楚分型。酶切结果与测序结果吻合。结论本实验所建立的盐析法可以快速、简便、经济地从口腔拭子得到高质量的基因组DNA。

关 键 词:盐析  口腔拭子  DNA提取  单核苷酸多态性
收稿时间:2011/5/10 0:00:00
修稿时间:2011/10/19 0:00:00

A rapid salting out method for DNA extraction from buccal swabs
ZHU Wei-feng,LUO Da-y,TU Shuo,ZHANG Xia-li,JIE Ke-min,WAN Fu-sheng.A rapid salting out method for DNA extraction from buccal swabs[J].Academic Journal of Second Military Medical University,2011,32(12):1370-1375.
Authors:ZHU Wei-feng  LUO Da-y  TU Shuo  ZHANG Xia-li  JIE Ke-min  WAN Fu-sheng
Institution:Department of Biochemistry and Molecular Biology, Medical College, Nanchang University, Nanchang 330006, Jiangxi, China
Abstract:
Keywords:salting out  buccal swabs  DNA extraction  single nucleotide polymorphisms
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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