| Bcl-xl/LipofectamineTM2000比值对人角膜基质细胞转染效率的影响 |
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| 引用本文： | 李新宇,李贵刚,朱雪菲.Bcl-xl/LipofectamineTM2000比值对人角膜基质细胞转染效率的影响[J].眼科新进展,2006,26(7):524-526. |
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| 作者姓名： | 李新宇 李贵刚 朱雪菲 |
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| 作者单位： | 430030,湖北省武汉市,华中科技大学同济医学院附属同济医院眼科 |
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| 摘 要： | 目的检测Bclxl/LipofectamineTM2000复合物中两者比值对转染人角膜基质细胞转染效率的影响,探讨其用于人角膜基质细胞基因转染的最佳比值。方法选择Bclxl/LipofectamineTM2000比值1∶2、1∶4、1∶8、1∶10四个实验组制备载体复合物转染人角膜基质细胞,转染时间24h。在转染后3d,采用半定量RTPCR检测目的基因Bclx1mRNA表达的变化;采用免疫组织化学染色法及流式细胞计数法检测目的基因Bclx1表达阳性细胞率。数据采用SPSS软件分析。结果Bclxl/LipofectamineTM2000载体复合物中两者比值能显著影响其对人角膜基质细胞的转染效率,存在最佳的比值。当Bclxl/LipofectamineTM2000比值为1∶8时,培养的人角膜基质细胞获得了最佳的转染效率。转染后3d,定量PCR显示1∶8组mRNA表达水平高于其他组(P<0.05),Bclx1免疫组化染色及流式细胞计数法均显示1∶8组转染效率最高,阳性细胞率为(45.6±2.0)%(免疫组织化学染色法),(48.3±3.0)%(流式细胞计数法)(P<0.05)。结论LipofectamineTM2000能有效介导外源基因Bclxl转染人角膜基质细胞。Bclxl/LipofectamineTM2000载体复合物比值为1∶8时转染效率最高。
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| 关 键 词： | 角膜基质细胞 基因转染 阳离子脂质体 |
| 文章编号： | 1003-5141(2006)07-0524-03 |
| 收稿时间： | 2005-10-24 |
| 修稿时间： | 2006-02-13 |
Effects of Bcl-xl/LipofectamineTM2000 ratio on the transfection efficiency in human keratocyte |
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| LI Xin-Yu,LI Gui-Gang,ZHU Xue-Fei.Effects of Bcl-xl/LipofectamineTM2000 ratio on the transfection efficiency in human keratocyte[J].Recent Advances in Ophthalmology,2006,26(7):524-526. |
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| Authors: | LI Xin-Yu LI Gui-Gang ZHU Xue-Fei |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Bcl-xl |
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