不同浓度丹皮酚影响膀胱癌5637 细胞增殖、迁移能力和侵袭能力的实验研究

目的：观察不同浓度丹皮酚对膀胱癌5637细胞增殖、迁移能力和侵袭能力的影响及对环氧化 酶-2 （COX-2）、前列腺素E2 （PGE2） 的调控作用。方法：通过观察不同浓度丹皮酚作用于膀胱癌5637细 胞24 h、48 h、72 h后的细胞存活率，计算半数抑制浓度（IC50），探讨不同浓度丹皮酚对膀胱癌5637细胞增 殖的影响。采用细胞划痕实验、Transwell侵袭实验观察不同浓度丹皮酚对膀胱癌5637细胞迁移能力和侵袭能 力的影响。通过酶联免疫吸附试验法测定不同浓度丹皮酚的含药培养基处理膀胱癌5637细胞24 h后对环氧化酶 -2（COX-2）、前列腺素E2（PGE2)含量及COX-2活性的影响。结果：膀胱癌5637细胞的存活率随丹皮酚浓度 的增加而逐渐下降。在72 h、200 μg/mL条件下，丹皮酚对细胞增殖的抑制作用最为明显。处理24 h、48 h、 72 h，25 μg/mL组、50 μg/mL组、100 μg/mL组、200 μg/mL组的膀胱癌5637细胞存活率均低于对照组，差异 均有统计学意义（P＜0.05）。处理24 h，50 μg/mL 组、100 μg/mL 组、200 μg/mL 组的细胞存活率均低于 6.25 μg/mL 组、12.5 μg/mL 组（P＜0.05），100 μg/mL 组、200 μg/mL 组的细胞存活率均低于25 μg/mL 组、 50 μg/mL组（P＜0.05），200 μg/mL组的细胞存活率低于100 μg/mL组（P＜0.05）。处理48 h、72 h，50 μg/mL 组、100 μg/mL 组、200 μg/mL 组的细胞存活率均低于6.25 μg/mL 组、12.5 μg/mL 组、25 μg/mL 组（P＜ 0.05），100 μg/mL组、200 μg/mL组的细胞存活率均低于50 μg/mL组（P＜0.05），200 μg/mL组的细胞存活 率低于100 μg/mL组（P＜0.05）。丹皮酚作用膀胱癌5637细胞24 h、48 h、72 h时的IC50分别为88.27、74.24、 77.07 μg/mL。细胞划痕实验表明，不同浓度的丹皮酚（25、50、100、200μg/mL） 处理膀胱癌5637细胞24 h 后，细胞的迁移能力均受到抑制，且呈浓度依赖性，各用药组的划痕愈合率均低于对照组（P＜0.05）；50 μg/mL 组、100 μg/mL组、200 μg/mL组的划痕愈合率均低于25 μg/mL组，200 μg/mL组的划痕愈合率低于50 μg/mL 组、100 μg/mL组（P＜0.05）。Transwell侵袭实验结果显示，不同浓度丹皮酚（25、50、100、200 μg/mL） 处 理膀胱癌5637细胞24 h后，细胞的侵袭能力均受到抑制。随着浓度增加，细胞穿过微孔滤膜的数量递减。 25 μg/mL 组、50 μg/mL组、100 μg/mL组、200 μg/mL组的穿膜细胞数均低于对照组（P＜0.05）。50 μg/mL 组、100 μg/mL组、200 μg/mL组的穿膜细胞数均低于25 μg/mL组（P＜0.05），100 μg/mL组、200 μg/mL组的穿 膜细胞数均低于50 μg/mL组（P＜0.05），200 μg/mL组的穿膜细胞数均低于100 μg/mL组（P＜0.05）。膀胱癌 5637细胞上清液中的COX-2、PGE2含量及COX-2的活性均随丹皮酚的浓度升高而降低，25 μg/mL组、50 μg/mL 组、100 μg/mL 组、200 μg/mL 组的COX-2、PGE2 含量及COX-2 活性均低于对照组，差异均有统计学意 义（P＜0.05）。50 μg/mL组的PGE2含量低于25 μg/mL组（P＜0.05），100 μg/mL组、200 μg/mL组的COX-2、 PGE2 含量及COX-2 活性均低于25 μg/mL 组（P＜0.05）；100 μg/mL 组的PGE2 含量低于50 μg/mL 组（P＜ 0.05），200 μg/mL组的COX-2、PGE2含量及COX-2活性均低于50 μg/mL组、100 μg/mL组（P＜0.05）。结论： 丹皮酚可抑制膀胱癌5637细胞增殖、迁移能力和侵袭能力的作用机制可能与降低COX-2、PGE2含量及COX-2 活性有关。