三氧化二砷通过降低Pin1表达调节Wnt/β-连环素通路抑制肝癌细胞增殖

目的　探讨三氧化二砷（ATO）在肝癌中对肽基脯氨酰顺/反式异构酶NIMA相互作用蛋白1（Pin1）表达的抑制作用及其分子机制。方法　在DepMap数据库中分析Pin1在23株人类肝癌细胞系中的表达情况，随后以人肝癌细胞系Huh7和小鼠肝癌细胞系H22为细胞模型，通过ATP法检测ATO对肿瘤细胞活力的影响；通过蛋白质印迹法、免疫荧光染色和qPCR检测ATO对Pin1表达在蛋白质水平和转录水平的作用。预先用氯喹预处理Huh7细胞抑制溶酶体途径后，通过蛋白质印迹法和免疫荧光染色检测ATO对Pin1表达的调控。通过皮下荷瘤小鼠模型和免疫组织化学染色验证ATO在体内对肝癌细胞生长和Pin1表达的影响。采用RNA测序富集分析ATO抑制Pin1所可能影响的信号通路，并通过蛋白质印迹法和qPCR验证。结果　在DepMap数据库中，23株人肝癌细胞系中Pin1的表达均呈现较高水平。在体外实验中，ATO处理后Huh7和H22细胞系的细胞活力均降低，细胞中Pin1在蛋白质和转录水平的表达均降低，但用氯喹抑制溶酶体途径逆转了ATO对Pin1表达的影响。在皮下荷瘤小鼠模型中，ATO表现出一定的抗肿瘤效果，免疫组织化学染色显示ATO处理后Pin1表达和肿瘤细胞增殖受到抑制。基因集富集分析结果显示在ATO处理的H22细胞中Wnt/β-连环素通路相关基因富集，在抑制H22细胞中Pin1表达后Wnt/β-连环素通路调控也受到影响。结论　ATO通过溶酶体途径抑制Pin1表达，从而影响Wnt/β-连环素信号通路来抑制肝癌细胞增殖。

Arsenic trioxide regulates the Wnt/ β-catenin pathway to inhibit the proliferation of hepatocellular carcinoma cells by decreasing the expression of Pin1