荧光定量PCR法鉴别蛤蚧定喘丸中醋鳖甲

目的 建立蛤蚧定喘丸中醋鳖甲的DNA分子鉴定方法。方法 根据鳖、佛罗里达鳖线粒体基因序列的差异设计特异性引物TS和AF,进行荧光定量PCR和方法学考察，然后对市售蛤蚧定喘丸中醋鳖甲进行鉴定。结果 含有鳖、佛罗里达鳖的DNA样品仅与相应引物扩增后可检测到荧光信号，有特定温度单一峰，T_m分别为77.45、79.72℃。该方法的检测限为10 copies/μL,重复性较高(CV<1%)。10批蛤蚧定喘丸中有9批仅检出鳖DNA,被鉴定为正品；1批同时检出鳖DNA和佛罗里达鳖DNA,被鉴定为掺伪品。结论 本研究所建立的方法可快速、可靠地鉴定蛤蚧定喘丸中醋鳖甲炮制品成分，有助于监管含醋鳖甲成方制剂的质量，并为成方制剂中动物药成分的专属性鉴定研究提供新途径。