隐丹参酮通过调节TGF⁃β/Smad通路改善高氧诱导肺损伤的纤维化过程

目的：探讨隐丹参酮（cryptotanshinone，CTS）对高氧诱导的支气管肺发育不良（bronchopulmonary dysplasia，BPD）大鼠肺纤维化的影响及作用机制。方法：体内实验：将50只新生雄性SD大鼠随机分为空气组、高氧组、CTS低剂量组（7.5 mg/kg）、CTS 中剂量组（15.0 mg/kg）及CTS高剂量组（30.0 mg/kg）。高氧组及CTS干预组大鼠饲养于氧浓度95％的氧箱中，空气组饲养于空气中。CTS干预组大鼠生后每日给予CTS腹腔注射，空气组及高氧组每日腹腔注射同等体积DMSO。7 d后安乐死全部大鼠后取肺组织用于后续实验。应用HE染色观察肺泡病理改变；通过Masson染色观察肺组织纤维化程度；RT-qPCR法检测转化生长因子β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）及α平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin，α-SMA）的mRNA 水平；Western blot检测细胞信号转导分子（small mother against decapentaplegic，Smad）2/3、p-Smad2/3的表达。体外实验：选用人胚肺成纤维细胞（human fetal lung fibroblast-1，HFL-1），按照培养条件分为空气组、高氧组及CTS干预组，空气组常规条件下培养，而高氧及干预组置于95％O₂恒温培养箱中培养24 h，干预组加入CTS 10 μmol/L。CCK-8实验检测细胞活力；Western blot检测TGF-β1、 α-SMA、p-Smad2/3、Smad2/3蛋白表达变化。结果：与对照组相比，高氧组大鼠肺泡形态紊乱、间隔增宽，RAC值下降，纤维化评分上升（P<0.05）；TGF-β1及α-SMA的mRNA水平升高（P<0.05）；p-Smad2/3表达升高（P<0.05）；不同剂量的CTS给药后可改善上述指标（P<0.05）；同时，CTS还可以降低高氧后HFL-1细胞的TGF-β1、α-SMA、p-Smad2/3、Smad2/3表达（P<0.05）。结论：CTS 可通过TGF-β/Smad通路改善高氧诱导肺损伤的纤维化过程。