玉女煎体外抗炎最佳活性部位筛选及物质基础研究

目的：筛选出玉女煎体外抗炎最佳活性部位,并对其化学成分进行研究。方法：玉女煎复方采用水提取,提取物浓缩后经D101大孔树脂进行粗分,分为水洗脱、30 %乙醇-水洗脱、60 %乙醇-水洗脱及95 %乙醇-水洗脱四个洗脱部位。采用脂多糖诱导小鼠巨噬细胞炎症模型评价玉女煎水提液及各洗脱部位的抗炎活性。研究对象包括空白对照组、脂多糖模型组和脂多糖+药物组。使用MTT法和Griess法来评估细胞的存活率和NO的生成量。随后对筛选出的最佳活性部位的抗炎活性进行验证,ELISA实验检测IL-1β、TNF-α、IL-6水平,显微暗场成像法观察细胞形态,免疫荧光法检测细胞内NF-κB p65表达。最后通过MCI柱分离结合活性追踪的方法对最佳活性部位的化学成分进行分离,通过核磁共振仪进行鉴定。结果：玉女煎水提液、水洗部位、30%乙醇-水洗部位及60%乙醇-水洗脱均有显著抗炎活性,其中水洗部位和30%乙醇-水洗部位抗炎活性弱于水提液,60%乙醇-水洗脱部位抗炎活性最强,显著强于水提液；95 %乙醇-水洗部位无抗炎活性。60%乙醇-水洗脱部位对脂多糖诱导的细胞形态改变、NF-κB p65表达及入核增加的有显著抑制作用最强,最后从该部位分离出了5个化合物,其中3个归属知母。结论：60% 乙醇-水洗脱部位为玉女煎抗炎的最佳活性部位,知母可能是其抗炎活性的主要贡献者。

Screening of the Best Anti-inflammatory Active Fraction of Yunvjian in Vitro and Study on Its Substance Basis