水仙环素通过调控PLK1/AKT信号通路诱导三阴性乳腺癌细胞细胞周期阻滞和凋亡

摘 要：目的 研究水仙环素（Narciclasine，Nas）对人三阴性乳腺癌（Triple negative breast cancer，TNBC）细胞周期和凋亡的抑制作用及分子机制。方法 采用细胞增殖-毒性检测试剂盒（Cell Counting Kit-8，CCK-8）、克隆形成、Transwell、流式细胞术等实验分析Nas对TNBC细胞株MDA-MB-231细胞增殖和侵袭能力的抑制作用，及对细胞周期和凋亡的诱导作用；利用免疫印迹（Western blot，WB）实验分析Nas对MDA-MB-231细胞株cle-Caspase-3、PARP、cle-PARP、PLK1、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、CDK1、Cyclin B、Cyclin A、p-21、p-27、p-62、LC3、γ-H2AX等蛋白质的影响。结果 不同浓度的Nas（浓度分别为0.5 μmol/L、1.0 μmol/L、2.0 μmol/L）能抑制MDA-MB-231细胞株的克隆形成（48 h抑制率分别为15.99%、24.76%和54.17%）、侵袭能力（48h抑制率分别为0.68%、23.20%和45.27%），可将细胞周期阻滞于G2期（48 h阻滞率分别为75.50%、140.56%和316.06%），可对细胞凋亡起到诱导作用（48 h凋亡诱导率分别为105.39%、199.73%和375.74%；72 h凋亡诱导率分别为104.45%、244.96%和709.60%）。分子机制实验显示Nas可以显著促进cle-Caspase-3、cle-PARP、γ-H2AX、p-21及p-27等蛋白质的表达，显著抑制PLK1、p-PI3K、p-AKT、CDK1、Cyclin B等蛋白质的表达水平，而对PARP、p-62、LC3-II/I、PI3K、Cyclin A等蛋白质的表达水平影响不明显。结 论 Nas能抑制MDA-MB-231细胞株的克隆形成、侵袭能力，对凋亡起到诱导作用，并将细胞周期阻滞于G2期，该机制可能通过调节PLK1/AKT信号通路来实现。

Narciclasine induces cell cycle arrest and apoptosis in triple negative breast cancer cells by regulating PLK1/AKT signal pathway