实时荧光定量RT-PCR在脊髓灰质炎病毒型内鉴定中的应用

目的应用实时荧光定量RT-PCR(rRT-PCR)对脊髓灰质炎病毒(PV)进行型内鉴定(ITD)及基因型鉴定。方法以PV衣壳蛋白(Capsid Protein)VP1编码区基因序列为目标,设计并合成引物和Taqman探针,建立实时荧光定量RT-PCR检测体系,对WHO发放的PV株和实验室分离的PV株进行型内鉴定(ITD)和疫苗衍生PV株(VDPV)筛选。结果 10份WHO考核标本经ITD试验结果和ITD筛查后的5份苗类似株(SL)VDPV实验结果,经WHO验证完全符合;青海省脊髓灰质炎(下称脊灰)实验室2017年在健康儿童中分离获得2株PV,经ITD和VDPV,结果为SL1。毒株经国家脊灰实验室验证,与上报结果完全符合。结论 rRT-PCR方法操作简便、快速,特异敏感,适用于PV的型内鉴定及其感染的实验室诊断。