| 日本血吸虫毛蚴侵袭前后湖北钉螺差异表达cDNA文库的构建与分析 |
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| 引用本文： | 刘琴,李石柱,张仪,周晓农.日本血吸虫毛蚴侵袭前后湖北钉螺差异表达cDNA文库的构建与分析[J].中国血吸虫病防治杂志,2010,22(6):539-543. |
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| 作者姓名： | 刘琴 李石柱 张仪 周晓农 |
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| 作者单位： | 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所、卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室,上海,200025 |
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| 基金项目： | 国家重大科技专项，上海市自然科学基金，中国博士后科学基金后科学基金 |
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| 摘 要： | 目的构建湖北钉螺被日本血吸虫毛蚴侵袭前、后差异表达cDNA文库,筛选湖北钉螺免疫相关分子,为探讨病原与中间宿主的相互作用奠定基础。方法提取被日本血吸虫毛蚴侵袭前、后湖北钉螺的头足部组织总RNA,纯化mR-NA,反转录合成cDNA。分别以被日本血吸虫毛蚴侵袭前湖北钉螺(未处理组)和被日本血吸虫毛蚴侵袭后湖北钉螺(处理组)的头足部组织作为检测方(Tester)和驱动方(Driver),利用PCR方法选择cDNA杂交试剂盒分别进行正向和反向抑制性消减杂交。将获得的正向抑制性消减杂交产物克隆入pGEM-T载体,重组质粒转入E.coliDH5α,对菌液用PCR法扩增鉴定其中的插入片段。随机抽取354个阳性克隆进行DNA序列分析,将所得表达序列标签(ESTs)序列在线进行BLAST分析。结果从正向文库随机挑取的354个阳性克隆中测得350个ESTs序列,生物信息学分析发现了34个湖北钉螺新基因,其中1个与已知基因部分同源。结论成功建立了被日本血吸虫侵袭前、后湖北钉螺差异表达片段cDNA消减文库,发现了湖北钉螺新基因,为筛选与湖北钉螺天然免疫相关的分子、进一步探讨中间宿主与病原的相互作用及筛选血吸虫病传播阻断疫苗候选分子奠定了基础。
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| 关 键 词： | 湖北钉螺 日本血吸虫 抑制消减杂交 差异表达cDNA文库 |
Construction and analysis of differentially expressed cDNA library for Oncomelania hupensis pre-and post-exposed to miracidium of Schistosoma japonicum |
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| Liu Qin,Li Shi-zhu,Zhang Yi,Zhou Xiao-nong.Construction and analysis of differentially expressed cDNA library for Oncomelania hupensis pre-and post-exposed to miracidium of Schistosoma japonicum[J].Chinese Journal of Schistosomiasis Control,2010,22(6):539-543. |
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| Authors: | Liu Qin Li Shi-zhu Zhang Yi Zhou Xiao-nong |
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| Institution: | National Institute of Parasitic Diseases,Chinese Center for Disease Control and Prevention,Key Laboratory of Parasite and Vector Biology,Ministry of Health,Shanghai 200025,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Oncomelania hupensis Schistosoma japonicum Suppression substractive hybridization Differentially expressed gene |
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