华支睾吸虫3个半胱氨酸蛋白酶N端短片段原核表达及其抗原性分析

目的 通过克隆和表达获得华支睾吸虫3个半胱氨酸蛋白酶N端短片段重组蛋白并分析其抗原性。方法 以pET-28a-CsCP1-3重组质粒为模板进行目的片段CsCP1a-3a PCR扩增，构建pET28a-CsCP1a-3a表达载体，并转化至BL21(DE3)大肠埃希菌，经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达，表达产物进行SDS-PAGE分析；表达产物经变性、纯化及复性，与华支睾吸虫感染大鼠血清行Western blot分析。结果 成功构建pET28a-CsCP1a-3a重组质粒；SDS-PAGE分析显示，重组蛋白CsCP1a-3a以包涵体形式表达；重组蛋白CsCP1a-3a可被华支睾吸虫感染后第4、5周大鼠血清识别。结论 重组蛋白CsCP1a-3a具有较好抗原性，可作为华支睾吸虫感染诊断候选分子。