苦碟子注射液对氧糖剥夺损伤脑微血管内皮细胞NF-κB表达的影响

目的研究苦碟子注射液对氧糖剥夺/复氧损伤大鼠脑微血管内皮细胞(Rat Brain Microvascular Endothelial Cells,RBMEC)中核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)表达的影响,探究其治疗急性脑梗死可能的炎性作用机制。方法采用氧糖剥夺/复氧(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)的方法建立RBMEC缺血再灌注损伤模型。分为正常组、OGD/R组、苦碟子注射液组。氧糖剥夺6 h后,分别复氧0 h、3 h、6 h、12 h、24 h、48 h,并予模型细胞2%、4%、8%浓度的苦碟子注射液(KDZ),采用MTS法测定细胞活性,分别筛选造模最佳时效点及药物最佳量效。采用免疫荧光染色法观察3组NF-κB表达,Western Blot方法检测3组NF-κB分别在总蛋白、胞浆蛋白、核蛋白中的表达量。结果免疫荧光染色观察NF-κB的表达:与正常组相比,OGD 6 h/R 3 h组NF-κB表达显著增加(P0.01);与OGD 6 h/R 3 h组相比,KDZ 4%组NF-κB表达显著降低(P0.01)。Western Blot法检测NF-κB蛋白表达量:在总蛋白、核蛋白中,与正常组相比,OGD 6 h/R 3 h组NF-κB蛋白表达增加(P0.05,P0.01);与OGD 6 h/R 3 h组相比,KDZ 4%组NF-κB蛋白表达降低(P0.05,P0.01)。而在胞浆蛋白中,三组的NF-κB蛋白表达差异无统计学意义(P0.05)。结论苦碟子注射液可以下调缺血再灌注损伤RBMEC中NF-κB蛋白的异常高表达,并可以一定程度上抑制NF-κB的活化,减少NF-κB的核内转移。