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MDR1启动子/荧光素酶质粒的构建及其在朊蛋白高表达胃癌细胞中的活性检测
引用本文:葛伏林,王婧,周毅,梁洁,张燕齐,郭雪艳,丁杰.MDR1启动子/荧光素酶质粒的构建及其在朊蛋白高表达胃癌细胞中的活性检测[J].陕西肿瘤医学,2007,15(5):601-603.
作者姓名:葛伏林  王婧  周毅  梁洁  张燕齐  郭雪艳  丁杰
作者单位:[1]第四军医大学西京医院全军消化病研究所,肿瘤生物学国家重点实验室,陕西西安710032 [2]解放军451医院消化内科,陕西西安710054
基金项目:国家自然科学基金资助项目(30572134)
摘    要:目的:构建含MDR1基因启动子的荧光素酶报告基因质粒,并检测其在朊蛋白高表达胃癌细胞系中的活性表达。方法:PCR克隆人MDR1基因启动子片段,通过亚克隆将启动子分别插入到pMD18-T载体和荧光素酶报告基因pGL3-Enhancer载体中,建立含MDR1启动子的荧光素酶报告基因质粒pGL-MDR1,并经测序及酶切确定扩增序列;脂质体基因转染法将pGL-MDR1转染入朊蛋白高表达胃癌细胞系SGC7901-PrP,并测定其荧光素酶活性。结果:PCR克隆出MDR1启动子经DNA测序证实序列正确,pGL-MDR1转染入朊蛋白高表达胃癌细胞系的荧光素酶活性,较转染入pcDNA3.1空载体细胞系相比升高3-5倍。结论:成功构建含MDR1启动子的荧光素酶报告基因质粒;上调朊蛋白表达可激活MDR1的转录活性。

关 键 词:多药耐药基因1  启动子  朊蛋白  胃肿瘤  荧光素酶报告基因
文章编号:1672-4992-(2007)05-0601-03
收稿时间:2007-01-15

Construction of luciferase reporter gene vector containing MDRI promoter gene and MDR] promoter activity in PrPc overexpressed gastric cancer cells
GE Fu - lin, WANG Jing, ZHOU Yi, LIANG Jie, ZHANG Yan- qi, GUO Xue -yan, DING Jie.Construction of luciferase reporter gene vector containing MDRI promoter gene and MDR] promoter activity in PrPc overexpressed gastric cancer cells[J].Shaanxi Oncology Medicine,2007,15(5):601-603.
Authors:GE Fu - lin  WANG Jing  ZHOU Yi  LIANG Jie  ZHANG Yan- qi  GUO Xue -yan  DING Jie
Abstract:
Keywords:MDR1  promoter  prion protein  stomach neoplasms  luciferase reporter gene
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