人肝癌细胞株QGY-7701亚细胞蛋白质组双向电泳技术的建立 |
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引用本文: | 袁拥华,杨晓兰,李伟,李龙江,汤为学,余瑜.人肝癌细胞株QGY-7701亚细胞蛋白质组双向电泳技术的建立[J].第三军医大学学报,2007,29(23):2292-2293. |
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作者姓名: | 袁拥华 杨晓兰 李伟 李龙江 汤为学 余瑜 |
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作者单位: | 1. 重庆医科大学 药学院药物化学教研室,重庆,400016 2. 重庆医科大学 基础医学院病理生理学教研室,重庆,400016 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(30371632)~~ |
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摘 要: | 目的优化人肝癌细胞株QGY-7701的蛋白质样品制备方法,建立其亚细胞蛋白质组双向电泳技术。方法分步提取人肝癌细胞株QGY-7701细胞质、细胞膜和细胞核蛋白,采用不同的方法除盐、浓缩样品,然后分别采用2种不同的水化上样缓冲液重悬样品,进行双向凝胶电泳。结果使用三氯乙酸/丙酮的除盐效果好,样品损失少;采用上样缓冲液(7mol/L尿素 2mol/L硫脲 4%CHAPS 40mmol/L Tris 65mmol/L DTT 2%两性电解质)有利于蛋白的溶解,获得更多的蛋白信息,检出的细胞质蛋白点数可达(995±53),细胞膜蛋白点数可达(1035±58),细胞核蛋白点数可达(893±45)。结论获得了清晰的人肝癌细胞株QGY-7701亚细胞蛋白质组双向电泳图谱。
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关 键 词: | 人肝癌细胞株QGY-7701 亚细胞蛋白质组 双向电泳 |
文章编号: | 1000-5404(2007)23-2292-02 |
修稿时间: | 2007年5月31日 |
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