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maspin/pEFIRES-N表达载体的构建及应用
引用本文:阎雄,姚榛祥.maspin/pEFIRES-N表达载体的构建及应用[J].第三军医大学学报,2005,27(22):2205-2208.
作者姓名:阎雄  姚榛祥
作者单位:重庆医科大学附属第一医院普通外科,重庆,400016;重庆医科大学附属第一医院普通外科,重庆,400016
摘    要:目的构建maspin/pEFIRES-N表达载体,为深入研究maspin基因抑制肝癌生长、转移、浸润作用和机制奠定基础.方法 PCR扩增maspin基因全长,将表达载体pEFIRES-N用EcoRⅠ XbaⅠ进行双酶切后,T4DNA连接酶连接成重组质粒,稳定转染到肝癌高转移细胞株mHCC-97中进行表达,检测稳定转染前后maspin表达的变化.结果重组质粒在大肠杆菌株JM109内扩增.提纯、纯化后用EcoRⅠ、XbaⅠ酶切鉴定及测序鉴定证明maspin基因已完整、正确的插入到pEFIRES-N表达载体,并在肝癌MHCC-97细胞中上调了maspin基因mRNA和蛋白水平表达,抑制了肝癌MHCC-97细胞增殖及浸润.结论成功构建了maspin/pEFIRES-N表达载体,能在真核细胞中表达.

关 键 词:maspin  pEFIRES-N表达载体  构建  应用
文章编号:1000-5404(2005)22-2205-04
收稿时间:2005-05-15
修稿时间:2005-08-27

Construction and expression of maspin/pEFIRES-N expression vector
YAN Xiong,YAO Zhen-xiang.Construction and expression of maspin/pEFIRES-N expression vector[J].Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae,2005,27(22):2205-2208.
Authors:YAN Xiong  YAO Zhen-xiang
Institution:Department of General Surgery, The First Affiliated Hospital of Chongqing University of Medical Sciences, Chongqing 400016, China
Abstract:
Keywords:maspin
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