重组腺病毒介导p21对小鼠视网膜新生血管生成的抑制作用 |
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引用本文: | 韩金栋,袁志刚,郑华宾,颜华. 重组腺病毒介导p21对小鼠视网膜新生血管生成的抑制作用[J]. 中华眼底病杂志, 2012, 28(5): 493-497 |
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作者姓名: | 韩金栋 袁志刚 郑华宾 颜华 |
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作者单位: | 300052,天津医科大学总医院眼科 |
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摘 要: | 目的 观察重组腺病毒-p21 (rAd-p21)对氧诱导小鼠视网膜新生血管(RNV)的抑制作用.方法 将56只健康7日龄C57BL/6J小鼠随机分为对照组、磷酸盐缓冲液(PBS)组、rAd-p21组及rAd-无目的基因对照(rAd-NC)组,每组14只.PBS组、rAd-p21组及rAd-NC组建立氧诱导RNV模型,并于小鼠11日龄时玻璃体腔分别注入1μl PBS、rAd-p21及rAd-NC.对照组不做任何处理.小鼠17日龄时,每组处死4只小鼠,摘取眼球分别作荧光视网膜铺片和切片,观察小鼠RNV发生情况;Image-Pro plus 6.0软件测量分析无灌注区面积;同时提取视网膜总RNA和总蛋白,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测p21、细胞周期素依赖蛋白激酶2(CDK2) mRNA及蛋白在视网膜组织中的表达.结果 荧光及光学显微镜观察发现,rAd-p21组小鼠视网膜无灌注区、新生血管及突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核较PBS组和rAd-NC组减少;rAd-p21组无灌注区面积较PBS组和rAd-NC组明显减少,组间差异有统计学意义(F=101.634,P<0.05).RT-PCR及Western blot检测结果显示,rAd-p21组p21 mRNA和蛋白表达明显高于对照组、PBS组及rAd-NC组,组间差异有统计学意义(F=839.664、509.817,P<0.05);rAd-p21组CDK2 mRNA和蛋白表达明显低于对照组、PBS组及rAd-NC组,组间差异也有统计学意义(F=301.858、592.882,P<0.05).结论 rAd-p21可通过上调p21表达、降低CDK2表达,抑制RNV生成.
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关 键 词: | 视网膜新生血管化/预防和控制 基因转移技术 转染 动物实验 |
Recombined adenovirus mediated delivery of p21 inhibits oxygen-induced retinal neovascularization in mice |
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Abstract: | |
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Keywords: | Retinal neovascularization/prevention & control Gene transfer techniques Transfection Animal experimentation |
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