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| 以ECHO克隆系统构建人生长激素的哺乳动物表达载体 | |
| 引用本文： | 汪宗桂,郑文岭,马文丽,梁念慈.以ECHO克隆系统构建人生长激素的哺乳动物表达载体[J].中国组织工程研究与临床康复,2006,10(20):110-112. |
| 作者姓名： | 汪宗桂 郑文岭 马文丽 梁念慈 |
| 作者单位： | 1. 广东医学院生物化学教研室,广东省,湛江市,524023 2. 华南基因组研究中心,广东省,广州市,510800 3. 南方医科大学基因工程研究所,广东省,广州市,510515 |
| 基金项目： | 中国科学院资助项目;广东省广州市科技攻关项目 |
| 摘 要： | 目的:构建ECHO克隆系统构建人生长激素的哺乳动物表达载体,以克服原核生物表达系统生产人生长激素存在的缺陷。方法:实验于2002-08在解放军广州军区广州总医院医学实验科进行。①先把人生长激素基因片段克隆到ECHO系统的供载体中,构建供载体pUni/Lox-HGH。②让该供载体与具Lox位点的受载体在Cre重组酶的作用下融合,构建出人生长激素的哺乳动物表达载体pcDNA4.1/pUni-HGH,使人生长激素基因处于CMV启动子的调控下,EcoRI单酶切及BamHI/EcoRI双酶切鉴定重组质粒。结果:由琼脂糖凝胶电泳和序列测定证实,用ECHO克隆系统构建的融合质粒中,确实含有人生长激素带内含子的基因序列。结论:用ECHO克隆系统可以构建人生长激素的哺乳动物表达载体,且方便、快捷,为取代原核生物表达系统生产人生长激素,提供了依据。 |
| 关 键 词： | 人生长激素 遗传载体 电泳 琼脂凝胶 |
| 文章编号： | 1671-5926(2006)20-0110-03 |
| 修稿时间： | 2005年7月5日 |
Cloning human growth hormone gene into the mammalian expression vector with ECHO system |
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| Wang Zong-gui,Zheng Wen-ling,Ma Wen-li,Liang Nian-ci.Cloning human growth hormone gene into the mammalian expression vector with ECHO system[J].Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research,2006,10(20):110-112. | |
| Authors: | Wang Zong-gui Zheng Wen-ling Ma Wen-li Liang Nian-ci |
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