| 一种高纯度多巴胺神经元原代培养方法的建立 |
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| 引用本文： | 白龙梅,李学忠,张志琳,刘春风.一种高纯度多巴胺神经元原代培养方法的建立[J].细胞与分子免疫学杂志,2008,24(4):403-405. |
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| 作者姓名： | 白龙梅 李学忠 张志琳 刘春风 |
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| 作者单位： | 1. 苏州大学附属第二医院神经内科,江苏,苏州,215004
2. 苏州大学附属第二医院神经内科,江苏,苏州,215004;苏州大学衰老与神经疾病实验室,江苏,苏州,215004 |
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| 基金项目： | 江苏省六大人才高峰基金 |
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| 摘 要： | 目的:通过胚胎中脑祖细胞(MPC)体外培养获得高纯度的多巴胺神经元培养体系.方法:取自E12鼠胚中脑腹侧的MPC悬液在添加bFGF的DMEM/F12/N2/L-抗坏血酸-2-磷酸酯倍半镁盐(AA-2P)培养液中扩增培养,5 d后停用bFGF,促进细胞分化,4 d后通过Neurobasal/阿糖胞苷(Ara-c)抑制胶质细胞生长,获得纯神经元,使用TH鉴定细胞,计数细胞比例和纯度,β-tubulin III鉴定成熟神经元,并计数细胞比例和纯度.结果:在添加了bFGF 20 μg/L的DMEM/F12/N2/AA-2P培养液中MPC增殖良好,体外培养7 d后细胞数量扩增到培养前的(16.54±1.25)倍;使用Neurobasal/阿糖胞苷后胶质细胞受抑制,神经元占94%以上,其中多巴胺(DA)能神经元的比例约(35.56±4.13)% .结论:E12鼠胚MPC原代培养合并使用阿糖胞苷是获取高纯度DA能神经元培养体系的可靠途径.
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| 关 键 词： | 中脑前体细胞 多巴胺能神经元 细胞培养 高纯度 多巴胺神经元 原代培养 胶质细胞 培养前 细胞数量 增殖 结果 成熟神经元 tubulin 比例 计数 使用 细胞生长 阿糖胞苷 细胞分化 停用 培养液 镁盐 磷酸酯 |
| 文章编号： | 1007-8738(2008)04-0403-03 |
| 修稿时间： | 2007年4月19日 |
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