| 人生长激素的酵母/哺乳动物穿梭载体的构建 |
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| 引用本文： | 汪宗桂,郑文岭,马文丽,梁念慈.人生长激素的酵母/哺乳动物穿梭载体的构建[J].广东医学,2005,26(11):1473-1475. |
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| 作者姓名： | 汪宗桂 郑文岭 马文丽 梁念慈 |
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| 作者单位： | 广东医学院生化教研室 广东湛江524023(汪宗桂，梁念慈)，华南基因组研究中心 广州510800(郑文岭)，南方医科大学基因工程研究所 广州510515(马文丽) |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(编号:39880044) |
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| 摘 要： | 目的酿酒酵母已被证实可作为载体应用于口服基因治疗及免疫中。为研究人生长激素(HGH)以酿酒酵母作为运送载体的口服基因药物,需要构建一种能够在酵母中复制而在哺乳动物细胞表达的HGH穿梭载体。方法利用ECHO克隆系统先构建出HGH的哺乳动物表达载体,使HGH处于CMV启动子的调控下;然后设计引物扩增CMV-HGH片段,连接到酿酒酵母表达载体pESC-URA中,构建HGH的酵母/哺乳动物穿梭载体。结果经EcoRI单酶切、EcoRI/SpeI双酶切、菌落PCR以及序列测定鉴定,确认所构建的确为酵母/哺乳动物穿梭载体pESC-CMV-HGH。结论成功构建的穿梭载体可在酿酒酵母中复制,在哺乳动物中受CMV启动子的调控进行表达,为HGH的口服基因药物研制打下了基础。
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| 关 键 词： | 人生长激素 酿酒酵母 穿梭载体 |
| 修稿时间： | 2005年7月5日 |
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